miR-150-5p 通过调控DDR1 表达对缺氧缺糖诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的影响①
2021-08-23王立侠韩金芬马明明郑州市第七人民医院神经电生理室郑州450000
王立侠 韩金芬 马明明 (郑州市第七人民医院神经电生理室,郑州450000)
缺血性脑卒中又称脑梗死,是由脑部供血障碍而引起的局限性脑组织缺血性坏死或脑软化,其发病率和致残率较高,是导致人类死亡和残疾的主要原因之一[1-2]。研究显示,miRNA 在急性缺血性脑卒中发生发展中具有重要作用[3]。研究报道,miR-150-5p 与缺血性脑卒中患者二级预防治疗的中期预后有关,参与脑血栓形成的生理病理过程[4]。缺血性脑卒中患者外周血miR-150-5p 表达显著降低,可作为缺血性脑卒中的生物标志物[5]。盘状结构域受体1(discoidin domain receptor 1,DDR1)是一种受体型蛋白酪氨酸激酶,其激活可活化一系列细胞内外信号传导,参与多种疾病过程[6]。抑制DDR1 活化可降低缺氧缺血脑损伤新生鼠皮层组织中微管相关蛋白Tau 磷酸化水平,促进乙酰胆碱释放,DDR1 抑制剂对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤具有保护作用[7]。但miR-150-5p对缺血性脑损伤的影响及机制尚未阐明。研究发现,缺氧缺糖可导致神经元损伤[8]。本研究采用缺氧缺糖(oxygen-glucose depri‑vation,OGD)处理大鼠大脑皮质神经细胞建立神经损伤模型,探究miR-150-5p对OGD 诱导的大鼠大脑皮质神经细胞损伤的影响及其机制是否与DDR1相关,为相关脑疾病治疗提供新的生物标志物和靶点。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 清洁级孕16~18 d SD 大鼠购自上海斯莱克实验动物有限公司,生产许可证号:SCXK(沪)2012-0002。
1.1.2 主要试剂与仪器 Neurobasal 培养基、B27、高糖DMEM、无糖DMEM 培养基购自美国Gibco 公司;胎牛血清购自Hyclone 公司;荧光定量试剂盒购自美国 Progema 公司;RIPA 蛋白裂解液、BCA 试剂盒购自江苏碧云天公司;……
