LncRNA MIR100HG在膀胱癌中的表达及功能的初步研究
2021-08-12应文伟王建峰丁振山何宇辉王爱军周晓峰
应文伟,王建峰,丁振山,陈 星,何宇辉,王爱军,周晓峰★
(1.北京大学中日友好临床医学院,北京 100029;2.中日友好医院泌尿外科,北京 100029;3.北京大学第一医院 泌尿外科,北京 100034)
在世界范围内,膀胱癌(BCa)在癌症中死亡率排名第九[1]。尽管手术等治疗的方法已有很大改善,但膀胱癌的复发率仍然很高,预后很差[2]。导致膀胱癌发展的生物学机制尚不清楚,越来越多的证据表明,某些lncRNA 在膀胱癌的进展中起着至关重要的作用。例如,MALAT1 通过特异性抑制miR-125b 并激活靶基因Bcl-2 和MMP-13 来促进膀胱癌[3]。Wang 等研究发现BCAR4 在膀胱癌中高表达,进一步研究表明BCAR4 促进膀胱癌的发展[4]。Xiong 等报道,NRON 表达的增加可促进膀胱癌的增殖、转移和EMT 过程[5]。
近年来,越来越多的研究人员探究了MIR100HG 与肺癌[6]、乳腺癌[7]、大肠癌[8]和其他肿瘤之间的关系。但MIR100HG 与膀胱癌发展之间的关系尚未确定。在本研究拟探讨MIR100HG在膀胱癌中的表达模式,并在体外细胞及裸鼠体内验证MIR100HG 对膀胱癌发生发展的影响。
1 材料与方法
1.1 组织样本
样本来自2016年2月~6月中日友好医院确诊的5 例膀胱癌患者。同时取10 例的20 个样本用做验证。研究得到中日友好医院伦理委员会批准。所有患者均签署了知情同意书,并且了解研究的所有细节。将所有收集的组织样品在RNAlater中冷冻并储存在-80℃。至少2 名病理学家参与了病理诊断。
1.2 RNA 提取和qRT-PCR
TRIzol 试剂盒(购自Invitrogen)用于从组织样品和膀胱癌细胞中提取总RNA。根据制造商的指南,PrimeScript RT 预混液(购自TaKaRa)用于反转录。然后,使用一步TB Green PrimeScript RT-PCR 试剂盒(购自TaKaRa)在ABI 7500 实时PCR 系统(Thermo 公司)上进行了定量实时PCR(qRT-PCR)。……
