驴小肽转运载体1基因的克隆、序列分析及组织表达研究
2021-08-09周苗苗刘桂芹刘文强朱明霞王长法
周苗苗 刘桂芹 刘文强 朱明霞 王长法
(聊城大学农学院毛驴高效繁育与生态饲养研究院,聊城 252000)
蛋白质是动物必不可少的营养元素,饲粮蛋白质在动物体内水解为氨基酸(amino acids,AA)或小肽后被肠道吸收。其中,小肽(二肽和三肽)是动物摄取蛋白质的主要形式[1]。小肽的吸收利用在动物营养物质代谢和动物健康方面有重要意义。肠道小肽的吸收主要依赖小肽转运载体1(oligopeptide transporter 1,PepT1)。PepT1是一种低亲和力、高容量的膜转运蛋白,属于质子偶联寡肽转运体(proton-coupled oligopeptide transporter,POT)家族,在质子电化学梯度的驱动下,能跨膜转运寡肽和肽类药物[2-4]。PepT1主要在小肠中表达,此外,在大肠[5-6]、瓣胃和瘤胃[7]、肾脏和肝脏[5,8]、胰腺[9]、性腺[5,10]中亦有表达。PepT1可以转运数千种寡肽和多种肽结构类似药物,如氨基头孢菌素、血管紧张素转化酶抑制剂以及抗病毒和抗肿瘤药物[11-12]。PepT1的表达和功能已在人类[13-14]、兔[8,15]、大鼠[16]、小鼠[17]、猪[18]、鸡[19]、牛[20-21]、绵羊[22]、牦牛[23]、斑马鱼[10]、大西洋鳕鱼[24]、大西洋鲑鱼[25]和双髻鲨[9]等多种动物中进行了研究。众多研究表明,PepT1在物种间高度保守,PepT1蛋白由大约708个AA残基组成,有12个跨膜区(transmembrane domains,TMD),且在TMD 9和TMD 10之间有1个大的细胞外环[13,16-18,21-22]。目前关于PepT1功能的研究主要集中在拟肽类药物转运以及胃肠道生理病理学等方面[2,11-12,26]。此外,PepT1的生物活性受底物、激素、年龄和生理条件等多种因素的调节[6,27-28]。PepT1在动物的生长和代谢中起着重要的生理作用。然而,PepT1在驴中的表达和功能研究还未见报道。因此,本试验拟研究驴(Equusasinus)PepT1(ePepT1)基因的克隆、序列分析及组织表达,以期为进一步研究驴的营养物质转运提供理论依据。……
