miR-98-3p对食管癌KYSE-30细胞增殖和凋亡的影响及机制*
2021-08-06孔岳锋喻汉华刘沛武
孔岳锋, 喻汉华, 刘沛武
1长江大学第二临床医学院放射科,荆州 434020 2武汉市第四医院,华中科技大学同济医学院附属普爱医院放射科,武汉 430032
微小RNAs(miRNAs)是一类被证实与包括食管癌在内的多种肿瘤的发生、发展密切相关的内源性非编码小分子RNA,与靶基因3′UTR区特异性结合从而调控mRNA的表达是其主要作用机制[1-2]。研究表明,miR-98-3p在肺癌、肝癌等多种肿瘤组织或细胞中低表达,并在肿瘤细胞的增殖、凋亡和侵袭等过程中发挥负性调控作用,但其在食管癌细胞中的作用机制尚不明确[3-4]。本研究首先检测了食管癌组织及细胞系中miR-98-3p的表达水平,其次以KYSE-30为细胞模型研究miR-98-3p对食管癌细胞增殖和凋亡能力的影响,最后进行靶基因验证并探讨其作用机制,以期为食管癌的治疗提供一个新的靶标。
1 材料与方法
1.1 食管癌标本
收集2016年1月~2017年12月在武汉市第四医院暨华中科技大学同济医学院附属普爱医院经病理确诊的35例食管鳞状细胞癌患者的组织标本,其中男性21例、女性14例,平均年龄(56.34±9.42)岁,所有患者均由病理确诊,术前未进行放化疗。手术切取瘤体区域及癌旁组织,并迅速置于液氮罐中临时存储,随后转移至-80℃冰箱保存。本研究符合作者所在单位人体试验伦理委员会所制定的伦理学标准(伦理审批号:PH20150903),且所有患者均签署知情同意书。
1.2 主要试剂和仪器
人食管癌细胞系(TE-1、Eca-109、KYSE-30)、人食管上皮细胞系HEEC均购自中国科学院上海细胞库;miR-98-3p模拟物(miR-98-3p mimics)、miR-98-3p抑制物(miR-98-3p inhibitors)及阴性对照物miR-NC均由上海吉玛生物科技公司设计及合成;……