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双荧光素酶报告基因系统在家蚕基因启动子研究中的应用

2021-03-18欧阳萃鸿陈太生谢晓乐李荣松

广东蚕业 2021年1期
关键词:检测系统

欧阳萃鸿 陈太生 谢晓乐 李荣松 田 铃

(华南农业大学动物科学学院 广东广州 510642)

启动子是基因结构中一段可以被RNA 聚合酶识别、结合、起始转录的DNA 序列,它含有RNA 聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列。启动子本身不被转录,而是通过其中的反应元件(response elements)与转录因子(transcription factor)结合进而控制基因的转录活动。转录调控是调节基因功能最直接、有效的方式[1]。将目的基因的启动子区域构建至双荧光素酶报告基因表达载体中,通过检测双荧光素酶报告基因系统荧光蛋白的酶活,从而分析目的基因启动子的转录活性,这是基因转录调控研究中常用且有效的手段之一[2]。家蚕是鳞翅目昆虫的模式生物,本文以家蚕基因启动子调控机制的研究为切入点,对双荧光素酶报告基因系统的工作原理与特点、研究和应用现状进行综述,有助于我们从细胞和分子层面理解昆虫生长发育过程的基因转录表达调控机制,为今后该系统在昆虫中的深入应用提供思考。

1 双荧光素酶报告基因系统的发展历史

荧光素酶是最初从自然界发光生物中获得的一种可以催化对应的荧光底物发生氧化反应产生荧光的蛋白酶类物质,哺乳细胞没有内源性荧光素酶[3]。荧光底物与酶发生反应产生的光其本质是一种生物萤光,属于可见光,不依赖外源激发光作用,在自然界一些发光生物身上通常能见到这种生物萤光。而荧光则是通过激发光照射荧光物质……

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