方道成，陈立新，王 勇，唐春华，高 强，胡媛媛

(上海交通大学医学院附属松江医院：1.泌尿外科；2.全科医学科，上海 201600)

肾结石是一种常见的泌尿外科疾病，在欧洲发病率约5%～9%，亚洲1%～5%[1]。其发病率和复发率高，以草酸钙结石最为常见[2]。既往人们已经发现氧化应激和炎症反应是肾结石形成的重要环节[3]，但人们对于肾结石的具体形成机制仍未完全弄清，随着研究的深入，人们发现纳米细菌与肾结石的形成有着密切关系[4]，纳米细菌可诱导肾小管氧化应激，促进肾结石的形成。

N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)作为临床常见药物，是谷胱甘肽合成前体，具有强抗氧化作用，可清除体内已生成的自由基，干扰自由基的产生[5]。因此，本研究采用纳米细菌建立了大鼠肾结石模型，研究NAC对纳米细菌致大鼠肾结石形成的影响，旨在明确NAC对纳米细菌致肾结石大鼠的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器丙二醛(malonaldehyde，MDA)试剂盒、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)试剂盒、草酸(oxalic acid，Oxa)检测试剂盒均购自贵州国康生物制药公司；PCR扩增试剂盒及引物由上海生工生物工程有限公司提供；多功能酶标仪(Bio-tech公司)；JH-722型分光光度计(上海度洋仪器有限公司)。

1.2 纳米细菌分离培养收集2016年9月至2017年9月在上海交通大学医学院附属松江医院实施泌尿外科手术的患者的肾结石标本10例，排除感染、内分泌疾病、多系统结石等患者，采集后置于-80 ℃冰箱保存。将保存的肾结石样本去矿物质处理(1 mol/L HCl，30 min)，然后采用PBS溶液进行中和、洗涤，再碾碎、离心(20 000 r/min，40 min)后，经滤膜过滤，收集滤液1 mL加入PMBI1640培养液(含10%热灭活γ胎牛血清)，于pH为7.4的37 ℃、5%体积分数CO2条件中培养，30 d换液1次。……