韦美德，胡礼宾，秦志丽，黄榆苏，凌建生

（广西医科大学第四附属医院医学检验科，广西 柳州 545005）

按ISO 15189认可的要求，临床实验室中通过认可的项目，应每年进行仪器比对，样本量应≥20例，浓度应覆盖测量范围，比对结果应满足要求；如比对结果不一致时，应分析原因，采取必要的纠正措施，并评估纠正措施的有效性，以保证实验室中不同分析系统的检测结果具有一致性和可比性[1]。广西医科大学第四附属医院医学检验科有2台cobas c702全自动生化分析仪（简称c702-1和c702-2），而同型号的不同仪器检测同一份样本也不可避免地存在系统误差[2]。为此，本研究拟通过2台同型号的生化分析仪血清钙检测结果的比对分析，探讨比对结果不通过的原因和纠正措施。

1 材料和方法

1.1 样本来源

收集广西医科大学第四附属医院门诊和住院患者新鲜血清样本20份，血清钙浓度覆盖高、中、低水平，每份血清样本体积不少3 mL，且无黄疸、脂血或溶血。

1.2 仪器和试剂

cobas c702全自动生化分析仪（瑞士罗氏公司）及配套试剂、c.f.a.s校准品。多参数质控品购自美国伯乐公司。

1.3 方法

1.3.1 仪器保养与质量保证 2台仪器比对当天室内质量控制（简称室内质控）结果在控，近期室间质量评价（简称室内质评）成绩合格，2台仪器比对时性能良好。

1.3.2 比对仪器的确定 以连续多年参加国家卫生健康委临床检验中心、广西省临床检验中心室间质评，成绩优秀的仪器（c702-2）为比对仪器，c702-1为试验仪器。

1.3.3 样本测定 按本实验室比对程序要求，将20份血清样本同时在2台仪器上进行血清钙浓度检测。

1.3.4 判断标准 （1）2台仪器比对结果r2≥0.95，且有≥80%的结果符合|偏移%|≤该项目比对质量目标；（2）平均偏移的绝对值应低于本实验室规定的允许范围；（3）各医学决定水平值代入直线回归方程（Y=aX+b）后的理论值与实际值的偏移应低于本实验室规定的允许范围，a值在1.00±0.05范围内，r2≥0.95。

2 结果

2.1 血清钙首次比对结果

c702-1与c702-2比对结果的绝对偏移为-0.16～0.08 mmol/L，有65%的结果符合|偏移%|≤该项目比对质量目标，平均|偏移%|为4.94%，医学决定水平处的|偏移%|为3.38%。线性回归方程为Y=1.040 1X-0.199 9（r2=0.987 1），见图1。比对结果通过率为65%，未达到≥80%的要求，本次比对未通过。

图1 c702-1与c702-2血清钙首次比对的线性回归分析

2.2 首次比对不通过原因分析

2.2.1 携带污染或试剂干扰因素 首先考虑试剂加样携带污染或干扰。通过查看相关文献并进行血清钙干扰排查试验后，确认c702-2试剂仓试剂的排列顺序合理，不存在携带污染或干扰。c702-1试剂仓中排列于血清钙试剂前的镁和总蛋白试剂均对血清钙检测有干扰作用。因此，将镁和总蛋白试剂的摆放位置移至血清钙试剂之后。

2.2.2 仪器准确度因素 通过查看近期室间质评和室内质控结果，确认仪器性能良好，血清钙结果在控，但室间质评和室内质控结果均高于靶值，考虑为定标原因引起。通过查阅文献并进行相关分析后，判断可能是校准品溶剂原因和空白对照液选取不当。通过对比排除试验并进行验证，发现用去离子水复溶校准品，用去离子水作为空白进行定标后，血清钙的室内质控结果和室间质评结果更接近于靶值。

2.3 实施纠正措施后血清钙的第2次比对结果

第2次比对结果显示，c702-1与c702-2血清钙检测结果的绝对偏移为-0.05～0.06 mmol/L，各项判断指标结果均符合要求。线性回归分析见图2。比对结果可接受，比对通过。

图2 c702-1与c702-2血清钙第2次比对的线性回归分析

3 讨论

在临床生化检测中，很多实验室采用蒸馏水复溶校准品、质控品，并进行本底空白定标（本实验室之前也习惯用0.9% NaCl溶液或蒸馏水作空白对照，用蒸馏水复溶c.f.a.s校准品、质控品），而仪器系统用水中采用去离子水、蒸馏水或纯净水的情况均存在。本研究结果显示，校准品、质控品复溶剂及本底空白定标液与仪器系统用水不一致可能会对血清钙的检测造成一定影响，导致仪器比对出现差异。本实验室根据本研究结果，规定使用与仪器系统用水同源的去离子水进行空白定标对照，复溶校准品、质控品，同时更正了实验室相应的标准操作规程。因此，建议统一仪器实验用水，校准品、质控品复溶剂及本底空白定标液选取与仪器系统用水同源的液体。因实验用水在纯水机等水源供给过程中，水（包括去离子水）中都不可避免地含有极少量的钙、镁等离子或杂质，而在检测钙、镁等项目或其他项目时，使用的试剂均为浓缩试剂，需加水（实验用水）稀释，采用相同来源的水来进行空白定标，复溶校准品、质控品，可有效去除本底中钙、镁等离子或杂质的影响，使结果更加准确。

有研究结果显示，镁和总蛋白对钙离子测定有干扰作用，且镁的干扰作用大于总蛋白[3]。镁的测定试剂中含有乙二醇二乙醚二胺四乙酸，该成分为钙的络合剂。另外，钙的测定方法一般采用邻甲酚酞络合酮比色法，由于方法学的缺陷，影响因素较多，试剂开瓶放置一段时间后会有轻微的颜色变化，影响检测结果，所以临床实验室均规定每天或间隔一定时间需对钙项目进行定标。由于钙测定的干扰因素较多，加上我国卫生行业标准WS/T 403—2012[4]推荐使用的钙项目的允许总误差和比对质量目标要求均较严格，所以血清钙比对难以通过是长期困扰临床实验室的一大难题。

同一检测系统、不同检测系统同一项目检测结果可比是非常重要的，涉及到结果解释及临床应用，因此只有实现检测结果可比，才能保证不同系统检测结果的统一性和一致性，才能给临床提供准确、可靠的实验室数据。即使使用不同参考区间的不同检测系统，因方法学原理等差异无法实现可比时，也要将这种结果差异告知临床，并采取风险控制措施（如在检验报告上做出明确标识等）。