唐 钧，曹红梅

（上海市金山区亭林医院检验科，上海 201505）

H1N1是甲型流感病毒的一种亚型，为RNA病毒，属正黏液病毒科，其“H”指的是血球凝集素（hemagglutinin，H），而“N”指的是神经氨酸酶（neuraminidase，N），2种都是糖蛋白，分布在病毒表面[1]。甲型H1N1流感病毒的宿主主要是犬科动物、鸟类和一些哺乳动物[2]。2009年3月，墨西哥首次发现了人感染甲型H1N1流感病毒的病例[3]，然后传播到全球。多项研究发现，甲型H1N1流感病毒是一种变异后的新型甲型流感病毒，其基因组内存在四源重配，是由人流感、猪流感和禽流感病毒基因混合而成的，该病毒的PBl基因源自人流感H3N2病毒，HA、NA、NP、NS和M基因源自猪流感H1N1病毒，PB2和PA基因源自禽流感H1N1病毒[4-5]。甲型H1N1流感病毒可通过直接或间接接触、呼吸道等途径在人群中传播，临床症状与普通流行性感冒十分相似，仅凭症状无法确诊，且该病发展迅速，若不能及时治疗，会出现肺炎、呼吸衰竭、多器官功能损伤等并发症，死亡率极高[6-7]。以往主要通过血清诊断法、特异性抗体检测法、细胞培养或鸡胚培养分离病毒检测甲型H1N1流感病毒感染，但这些方法较复杂且耗时较长，疫情暴发初期无法获得毒株抗体，因此无法满足临床诊断需求[8]。所以，建立简便、快捷的病毒检测方法十分重要。本研究通过对甲型H1N1流感病毒HA基因和NA基因序列进行分析，设计引物和TaqMan探针，建立检测甲型H1N1流感病毒遗传物质的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）方法，以期为防控甲型H1N1流感提供帮助。

1 材料和方法

1.1 试剂和仪器

甲型H1N1流感病……