酶抑制法快速检测牛奶中β-内酰胺酶抑制剂多残留
2021-07-28刘凤银王小鹏吴晓丹陈凤燕袁学文穆洪涛
刘凤银,李 滢,王小鹏,吴晓丹,陈凤燕,梁 岳,袁学文,穆洪涛,
(1.广东第二师范学院生物与食品工程学院,广东 广州 510303;2.广东省生物工程研究所,广州甘蔗糖业研究所,广东 广州 510316)
β-内酰胺酶抑制剂是一类小分子化合物,其能够与β-内酰胺类抗生素竞争性结合耐药菌产生的β-内酰胺酶,使酶失活,恢复细菌对β-内酰胺类抗生素的敏感性[1-4]。目前常见的β-内酰胺酶抑制剂有舒巴坦、克拉维酸、他唑巴坦和阿维巴坦,结构见图1。食品中残留的β-内酰胺酶抑制剂主要有两方面来源,一是内源性残留,在动物生产中,为提高抗生素的抗菌作用,β-内酰胺酶抑制剂常与β-内酰胺类抗生素联合使用,但由于不规范用药甚至滥用问题,导致奶及动物组织中β-内酰胺酶抑制剂残留[5-7];二是外源性添加,一些不法商家为掩盖奶中β-内酰胺类抗生素残留,加入β-内酰胺酶作为“解抗剂”,同时又加入β-内酰胺酶抑制剂以躲避β-内酰胺酶的检测,导致奶中β-内酰胺酶抑制剂残留;增大了奶及肉类的安全风险,对消费者身体健康造成威胁[8-9]。鉴于此,国内外均对β-内酰胺酶抑制剂制定了最高残留限量(maximum residue limit,MRL),欧洲医药评价局与我国农业部均规定牛、羊奶中克拉维酸的MRL为200 μg/kg[10-11]。

图1 4 种常见的β-内酰胺酶抑制剂化学结构式Fig.1 Chemical structures of four common β-lactamase inhibitors
目前对β-内酰胺酶抑制剂的检测方法主要有仪器分析法和酶抑制法。前者主要有高效液相色谱法[12-13]、液相色谱-串联质谱法[14-15]和毛细管电泳法[16]等,仪器分析法优点在于高准确性、高灵敏度,缺点在于设备昂贵、检测成本高,对从业人员的专业技术要求较高,无法满足快速、简便、大样本量筛查的检测需求。……
