杨汝晴，陈守峰，肖琳琳，陈玉磊,2，孙乐常,2，张凌晶,2，刘光明,2，曹敏杰,2,

（1.集美大学食品与生物工程学院，福建 厦门 361021；2.海洋食品深加工协同创新中心，辽宁 大连 116034）

脯氨酰内肽酶（prolyl endopeptidase，PEP）又称脯氨酸寡肽酶，是丝氨酸蛋白酶家族中的一员[1]。该酶不同于经典的胰蛋白酶-枯草杆菌丝氨酸蛋白酶，PEP家族的分子质量（约80 kDa）普遍大于胰蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶（25～30 kDa）。基于其对肽底物的特异性和不同的活性中心结构，PEP代表了一类相对较新的丝氨酸蛋白酶[2]。PEP易在含有脯氨酸残基的羧基处切割肽键，它也会在丙氨酸残基处分解，但水解速度较慢。PEP最显著的特性是对分解底物的选择性，仅限于长度不超过30 个氨基酸残基的寡肽[3]。

PEP最初是在人子宫中被发现，用于水解催产素半胱氨酰-酪氨酰-异亮氨酰-谷氨酰胺酰-天冬酰胺酰-半胱氨酰-脯氨酰-亮氨酰-甘氨酸（Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2）脯氨酸残基的C末端释放亮氨酰甘氨酸[4]。进一步工作发现PEP在水解生物活性肽如促甲状腺素释放激素、物质P、精氨酸加压素、神经紧张素、血管紧张素等方面也有作用[5]。此外，PEP是阿尔茨海默症、健忘症、抑郁症等疾病治疗的靶标酶[6]，针对PEP的特异性抑制剂有望成为候选药物[7-8]。在啤酒酿造过程中添加PEP，可水解来源于富含脯氨酸残基的α-醇溶蛋白多肽，达到防止啤酒浑浊、稳定其质量的效果[9-10]。该酶还用于重组功能肽的制备和口服治疗由于摄入麸质引起的过敏反应[11-12]。由于PEP独特的底物特异性，其可能与基质金属蛋白酶等一起参与富含脯氨酸残基的动物肌肉胶原的新陈代谢以及死后的软化自溶[13-14]。……