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微小RNA-338-3p靶向调控高迁移率族蛋白B1增强子宫内膜癌对紫杉醇敏感性的研究

2021-07-28邹学红汪俊王芳谢环

安徽医药 2021年8期
关键词:检测研究

邹学红,汪俊,王芳,谢环

子宫内膜癌是女性常见的恶性肿瘤之一,其发病率呈逐年上升趋势,但关于子宫内膜癌的发病机制仍不明确。有研究发现紫杉醇(paclitaxel,PTX)可抑制乳腺癌等肿瘤细胞,PTX 可联合顺铂用于子宫内膜癌的治疗。有多项研究表明miRNAs 可影响癌细胞对PTX 药物敏感性,如miRNA-101 增强乳腺癌MDA-MB-231 细胞对PTX 的药物敏感性。有报道称 miR-338-3p 可靶向 FOXP4 抑制肝癌细胞的增殖,miR-338-3p 通过调控 ZEB2 和MACC1 信号通路影响胃癌细胞上皮间质转化,但关于miR-338-3p 在子宫内膜癌的表达相关研究仍较少。有研究发现高迁移率蛋白B1(high-mobilitygroupboxprotein-1,HMGB1)在子宫内膜癌中表达上调,发挥促癌基因作用。但 miR-338-3p 是否通过调控HMGB1 表达增强子宫内膜癌对PTX 的敏感性仍未可知。本研究自2019年1-6月通过流式细胞术和CCK-8 实验,探讨miR-338-3p 调控人子宫内膜癌细胞HEC-1B 和ishikawa 对PTX 敏感性的影响分子机制,为深入探讨人子宫内膜癌发病和耐药机制以及改善子宫内膜癌患者的预后提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试剂及仪器

DMEM 培养基(C11965500BT)、青霉素和链霉素(15140122)为美国Gibco 公司产品;ECL 试剂(P0018)、RIPA 蛋白裂解液(P0013B)、HMGB1 抗体(AF1174)和蛋白印迹法(Western blottingting)所用试剂为碧云天公司产品;β-肌动蛋白(β-actin)为德国Merck 公司产品(A4700);Trizol 试剂为英潍捷基公司产品(15596026);CCK-8 试剂盒(CA1210)为索莱宝公司产品;mirPremiemicro RNA Isolation Kit(SNC50)为德国 Merck 公司产品;一步法miRNA反转录试剂盒(D1801)为新海基因公司产品;mirVana实时荧光定量聚合酶链反应(qRTPCR)miRNA detection Kit(AM1558)为赛默飞公司产品;双荧光素酶报告基因质粒(E1751)为美国Promega 公 司 产 品 ;Annexin V-FITC/PI 检 测 试 剂(CA1020)、CCK8 试剂盒(CA1210)为北京 Solarbio公司产品;PTX(33069-62-4,纯度≥98%)为成都德锐可生物科技有限公司;实验中所用引物、质粒均由江苏金唯智公司合成制备。……
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