豆粕源抗氧化肽的制备、鉴定与活性表征
2021-07-24潘风光蔡转章伍海波刘静波刘博群
潘风光, 蔡转章, 伍海波, 刘静波, 刘博群, 张 婷*
(1.吉林大学 食品科学与工程学院,吉林 长春130062;2.吉林大学 吉林省营养与功能食品重点实验室,吉林长春130062)
豆粕,是豆油加工的主要副产物,含有丰富的蛋白质,且80%以上为水溶性蛋白质[1]。然而在国内通常用于饲料加工,少部分用于发酵食品加工[2-3],造成了极大的蛋白质资源浪费。研究表明,将豆粕进行酶解,可制备出具有良好生物活性的功能肽[4],包括抗氧化肽[5-6]、血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽[7-8]、金属螯合肽[9-10]等,并且随着自由基理论的提出,天然抗氧化剂的需求量与日俱增[11]。因此,利用豆粕制备抗氧化肽,不仅能减少资源浪费,还能提高豆粕的附加值,在食品工业中具有广阔的应用前景。
目前国内外对于抗氧化肽的研究,仅局限于制备和活性检测,以及肽序列的鉴定及表征[12-14]层面。HE Shudong等[15]使用胰蛋白酶水解假鲍鱼制备抗氧化肽,并鉴定得到八肽序列DTETGVPT;WANG Xueqin等[16]经过分离纯化太平洋鲱鱼抗氧化肽,鉴定出LHDELT和KEEKFE 2条六肽序列;SHENG Jianyong等[17]从脱脂核桃中鉴定得到序列为DWMH的抗氧化肽。多肽结构与其抗氧化活性之间有着密切关系,因此鉴定抗氧化肽的序列结构是揭示构效关系的基础,也是后续定向大规模生产应用的前提。
本研究中以大豆粕为原料,采用超声辅助酶解法制备抗氧化肽并优化制备工艺,利用超滤进行分离纯化获得相对分子质量<1 000组分,应用LCMS/MS确证高活性组分中肽序列,最后合成上述肽序列进行活性表征。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
豆粕:市售;碱性蛋白酶:长春市天佳生物技术有限公司产品;氢氧化钠、盐酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠:北京化工厂制造;……
