吴丽蒙，龚 翔，张 燕

非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)以弥漫性肝细胞大泡性脂肪病变和肝小叶炎症为特征的临床病理综合征。心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)是NASH患者的主要死亡原因。NASH患者发生CVD越严重，死亡的几率越大[1]，表明CVD严重影响NASH病情进展和预后。对NASH患者外周血跨膜蛋白6超家族成员2(transmembrane 6 superfamily member 2，TM6SF2)基因水平研究发现其基因变异可降低血脂水平或对心血管疾病的发生起保护作用，提示TM6SF2基因表达状态或与NASH患者出现CVD有关[2]。TM6SF2为跨膜蛋白，其亚细胞结构主要位于内质网和高尔基体，能够调节胆固醇代谢，与早期动脉粥样硬化的形成有关[3]，但目前尚不知其与NASH患者出现CVD的内在联系。本研究通过分析NASH患者外周血TM6SF2基因rs58542936位点多态性和CVD发生情况，探讨了其临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2018年9月～2020年9月我院诊治的NASH患者93例，男51例，女42例；年龄为42～61岁，平均年龄为(55.8±7.6)岁。符合《非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018年更新版)》[4]的诊断标准，BMI为(25.1±3.0)kg/m2。排除酒精性肝病、病毒性肝炎、自身免疫性肝病和药物性肝损伤患者。本研究经我院医学伦理委员会审核通过，患者签署知情同意书。

1.2 外周血TM6SF2基因rs58542936位点多态性检测 取血液200 μl，加入缓冲液200 μl和蛋白酶K 20 μl，震荡混匀，放置片刻，加入缓冲液BD 350 μl，充分混匀，离心，将混合液放入含有吸附柱的收集管中回收液体，然后依次加入缓冲液GDB 500 μl、漂洗液PWB 600 μl。每加入一种液体，均在12000 r/m下离心30 s，去除液体，而后于吸附膜中间位置滴加洗脱缓冲液TB 100 μl，室温下放置2 min，在12000 r/m下离心2 min，获得检测样本，使用紫外分光光度仪检测DNA纯度，加入ddH2O将DNA稀释到20 μg/μl。……