袁晓丽 1，江莉 1，黄莉莉 1，胡斌

(1.绵阳市中心医院心血管内科，四川绵阳 621000;2.西南医科大学附属医院心血管内科，四川泸州 646000)

新生血管形成是肿瘤疾病发生及发展的重要过程，其不仅使肿瘤细胞生长，还能参与肿瘤细胞侵袭、转移过程[1]。肿瘤生长需要血管内皮细胞的旁分泌作用，而人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)是一种重要的内皮细胞[2]。探究HUVEC的增殖、运动是目前肿瘤研究的热点之一。近年来，研究显示micro RNA可参与肿瘤的发生发展过程[3]。miR-154-3p是近年来研究较多的一种micro RNA，Jiang等[4]研究表明，降低miR-154-3p的表达水平会促进乳腺癌细胞的增殖。Fan等[5]研究表明，过表达miR-154-3p可以抑制甲状腺癌的发展。近年来随着对肿瘤研究的深入，发现除了micro RNA，Smad蛋白也介导了癌细胞的生长过程。Troncone等[6]研究表明，Smad7在结肠癌细胞中的表达也被上调，为促癌因子。李勇等[7]研究表明，miR-181c靶向作用Smad7调控神经母细胞瘤的生物学特性。因此推测miR-154-3p也可以靶向调控Smad7对HUVEC的相关生物学特征有一定的影响，但目前尚无有关研究。本研究探究了miR-154-3p和Smad7的靶向性，同时分析了miR-154-3p作用后的HUVEC的生长、运动及免疫的机制机理，旨在为相关癌症的临床诊疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 主要细胞

HUVEC细胞由中国科学院细胞库提供。

1.2 主要试剂与仪器

TRAIL购自英国Pepro Tech公司；Lipo‐fectamine 2000购自Invitrogen公司；胰蛋白酶购自Biosharp公司；青霉素和链霉素购自Solarbio公司；TRAIL购自英国Pepro Tech公司；胎牛血清购自Hyelone公司；孔板购自美国Corning公司；VEGF抗体（货号：sc-7269）、Smad7抗体（货号：sc-365846）购自美国Santa Cruz公司；一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS）、白细胞介素-6(interleu‐kin-6,IL-6)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)均购自武汉华联科有限公司。……