谢彩凤，何志成,伍春娴，蒋赣，魏丹

（广东药科大学医药化工学院/广东省化妆品工程技术中心，广东中山 528458）

乳清分离蛋白（Whey Protein Isolate，WPI）不仅具有极高的营养价值和生物活性，而且具有良好的凝胶特性，常被用于食品、医药等领域[1-2]，WPI的凝胶受离子浓度、电解质类型、温度、pH等因素的影响[3-4]。前期，本课题组以CaCl2做电解质，研究了WPI常温下在慢速团聚（reaction limited aggrega‐tion，RLCA）条件下的团聚动力学和团聚体结构[5]。本研究选用另一种含有单价阳离子Na+的电解质，用广角光散射仪的动态光散射（dynamic light scat‐tering，DLS）方法和小角光散射仪的静态光散射（Static Light Scattering，SLS）方法，研究不同电解质类型对WPI的团聚动力学和团聚体结构的影响，拟为蛋白质的分析检测以及蛋白质团聚体在多孔材料和药物缓释领域的应用提供方法指导。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

针头式过滤器（25 mm GD/X，滤纸孔径0.45μm，英国Whatman公司）；广角光散射仪、BI-200SM角度测量器（美国Brookhaven Instruments）配以Ventus LP532型激光发射器（英国Laser Quantum），入射光波长为λ1=532 nm，测角范围20～145°；Mastersizer 2000小角光散射仪（英国Malvern），入射光波长为λ2=633 nm，测角范围0.02～40°。

1.2 试剂

WPI粉末（BiPro，JE345-3-420，Davisco Foods International Inc.，美国明尼苏达）；叠氮化钠（NaN3）、NaOH（固体）、盐酸溶液（0.1 mol/L）、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲溶液（HEPES）、NaCl（固态）均为分析纯，由Sigma-Aldrich公司提供；超纯水（自制）。

2 方法

2.1 WPI的热变性制备WPI-PAs及性能测量

WPI热变性制备乳清分离蛋白初级团聚体（WPI-PAs）的方法参见前期的工作[5]，最终得到Cp=50 g/L的胶体分散体，NaN3的最终浓度为3.08×10−3mol/L。配置好的分散体储存于温度为4℃左右的冰箱中备用。

2.2 用NaCl诱导团聚实验及分析检测

实验开始前，先用超纯水对WPI-PAs胶体分散体和NaCl溶液进行多次稀释，以免胶体溶液和电解质溶液浓度太高导致团聚实验过程中局部混合不均而出现大团聚体。……