李磊，董亚辉，杨探，李秋芳，聂永梅，李光，于风旭

心肌成纤维细胞约占非心肌细胞90%以上，在维持心脏结构和功能中起重要作用。有研究表明，心肌微血管密度下降可能导致心肌纤维化加重[1]。此外，当某些刺激因素比如转化生长因子-β1（TGF-β1）、血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）等刺激心肌成纤维细胞后，心肌成纤维细胞发生表型转换为肌成纤维细胞，后者可大量合成Ⅰ型胶原（Collagen Ⅰ）、Ⅲ型胶原（Collagen Ⅲ）等细胞外基质[2]。大量胶原致过度沉积及异常分布将导致心脏间质重构，进而引起心肌纤维化。

大电导钙激活钾通道（big conductance Ca2+-activated K+channel,BKCa）是钾通道中重要成员之一，不仅对细胞内Ca2+浓度具有敏感性，对电压也具有敏感特性[3]。大量研究表明，BKCa 的开放、关闭以及突变与多种疾病的发病机制有关[4-5]。Ha 等[6]发现硫化氢（H2S）可下调人心房成纤维细胞上BKCa的表达从而抑制心肌纤维化的进展，表明BKCa 可能参与心肌纤维化过程。

TGF-β1 是目前已知最强的促进纤维化的细胞因子之一[7]。有多篇文献报道，TGF-β1 是心肌纤维化过程中的关键因子[8-10]。而TGF-β1 参与心肌细胞纤维化的机制是否与BKCa 有关目前还不得而知。SB431542 被证明具有抑制TGF-β1 介导的纤维化作用[11-12]。本实验使用SB431542 抑制TGF-β1 信号通路，探索TGF-β1 在促进纤维化过程中与BKCa 可能的关系，以为心肌纤维化的预防和治疗提供思路。

1 材料与方法

实验动物：出生 2～3 d 的乳大鼠，购自西南医科大学动物实验中心。

主要实验试剂：DMEM 高糖培养基（Hyclone 公司，美国），TGF-β1（Bioyknbs 公司，美国），SB431542（Sigma 公司，美国），超纯RNA 提取试剂盒（康为世纪公司，中国），逆转录试剂盒（东洋坊公司，日……