许 超 王 娟 刘 锋 梁洁敏 刘伟伟

颞叶癫痫是成人最常见的药物难治性癫痫[1～4]，长期发作会造成严重脑损害[5]。中枢神经系统内的星形胶质细胞与小胶质细胞在癫痫发生过程中有重要作用[6]。肌细胞增强因子2c（myocyte enhancer factor 2C，MEF2C）被认为是调节癫痫的重要转录因子之一，可调控多种受体和信号通路的表达[7]。研究证实，miR-203可抑制MEF2C的表达[8]。本研究通过建立颞叶癫痫大鼠模型，探讨miR-203在颞叶癫痫疾病中的作用以及对MEF2C/NF-κB通路的影响，为深入阐述颞叶癫痫的发病机制以及治疗提供新的方向。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 健康成年雄性SD大鼠60只，8周龄，体重200～220 g，购自北京维通利华实验动物科技有限公司[许可证编号SCXK（京）2016-0006]。随机分为假手术组、模型组、阴性对照组、miR-203抑制剂组。

1.2 大鼠癫痫模型的制作 随机选择10只大鼠作为假手术组，其余50只大鼠采用文献[9]报道方法制作癫痫模型。用1%戊巴比妥钠（40 mg/kg）腹腔注射麻醉大鼠后，固定于立体定位仪上。以前囟为参考点，分别确定前、后囟在操纵器Z轴上的标度。用微量注射器将2.5 μl（0.5 μg/μl）海人酸注入大鼠左侧海马CA3区。假手术组相同部位注入等量的生理盐水。造模时14只大鼠死亡，将剩余36只存活大鼠随机分为模型组、阴性对照组和miR-203抑制组，每组12只。

1.3 干预方法 由上海基因化学有限公司构建一个携带miR-203 inhibitor的腺相关病毒（adeno-associated viral，AAV），阴性对照为空AAV载体。AAVmiR-203的滴度为1.0 ×1012，通过微量注射器以0.2 μl/min的速度注入左侧海马背侧（前额后3.12 mm，中线外侧3.0 mm，前额腹侧3.4 mm）和海马腹侧（前额后5.04 mm，中线外侧5.0 mm，前额腹侧6.4 mm），每个位置注射3μl。……