徐林，甄丽晓，齐宏顺,，李培培，吕涌涛,，冯肖亚，葛汝村

脑出血（intracerebral hemorrhage，ICH）是神经系统常见的急危重症，血肿周围脑组织水肿的形成是本病常见的继发性病理改变[1]。水肿可致颅内压进一步升高，造成神经功能障碍。血脑屏障（blood brain barrier，BBB）通透性的增加是形成血肿旁水肿的主要原因之一。研究发现，向大鼠ICH模型血肿腔内注射尿激酶不仅可以促进血肿吸收，还可减轻血肿周围脑组织水肿[2]。临床研究也证实了微创手术联合血肿腔内注射尿激酶治疗方法的有效性[3-5]。但其最佳治疗剂量及发挥作用的具体机制仍是研究的焦点。本实验通过对大鼠ICH后3 h给予不同剂量尿激酶进行干预，观察BBB的完整性，并对BBB紧密连接蛋白1（zonula occludens-1，ZO-1）和基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）的表达进行检测，为临床应用提供理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与材料

1.1.1 实验动物 SPF级雄性Wistar大鼠40只，体质量250～280 g；购于济南市朋悦实验动物繁育有限公司；实验动物生产许可证号：SCXK（鲁）20190003。

1.1.2 主要仪器及试剂 脑立体定位仪购于瑞沃德生命科技有限公司；台式高速离心机Fresco 21购于德国Thermo公司；PS普诺森FluorChem E Alpha化学发光凝胶成像系统购于Protein Simple公司；BX51荧光显微镜购于日本Olympus公司；尿激酶购自广东丽珠药业有限责任公司；ZO-1单克隆抗体、MMP-9单克隆抗体均购于Santa Cruz生物技术有限公司。

1.2 方法

1.2.1 ICH动物模型的建立 大鼠麻醉后固定于脑立体定位仪，取十字缝与人字缝交叉点为0点，向前0.2 mm，向左3 mm作为进针点，深度约6 mm。用微量注射器向颅内注入自体尾动脉血50μL，先注入20μL，停针7 min，再注入30μL，停针10 min，退针2 mm，再停针10 min，再完全退针缝合伤口。……