张晓宇，王 慧，杨昳津，熊智强，夏永军，王光强，艾连中，宋 馨

上海理工大学 医疗器械与食品学院，上海 200093

唾液乳杆菌(L.salivarius)是美国FDA认证的GRAS(generally recognized as safe)微生物，存在于人的口腔、肠道、阴道、粪便，以及部分动物(如鸡、猪等)的肠道内[1-3]。作为益生菌，唾液乳杆菌耐酸、耐胆盐、高产胞外多糖，对肠道上皮细胞有较强粘附作用，能促进机体免疫系统的形成，增强肠道屏障功能[4-8]。唾液乳杆菌还对宿主健康具有重要意义。通过产生类细菌素，可抑制金黄色葡萄球菌诱导的咽炎损伤，避免食源性致病菌单增李斯特菌的感染等；通过拮抗作用可抑制致病菌在肠道内定殖，降低幽门螺杆菌活性,减少胃炎发生[9-12]。

目前的研究大多针对唾液乳杆菌的分离鉴定及益生特性，通过分子生物学解析其代谢物和代谢途径的研究相对较少，这在一定程度上限制了唾液乳杆菌的开发利用，其主要原因是缺乏遗传操作工具。唾液乳杆菌为革兰氏阳性菌，细胞壁厚，这导致外源DNA转入唾液乳杆菌的效率较低[13]。为便于从基因水平对唾液乳杆菌进行研究，需要对其电转化方法进行优化。

本研究使用单因素法，分别从细菌的培养状态，甘氨酸浓度、蔗糖浓度，电压及复苏时间等方面对唾液乳杆菌的电转化方法进行优化，从而提高唾液乳杆菌的电转化效率，为唾液乳杆菌基因工程奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1菌株和质粒

唾液乳杆菌(LactobacillussalivariusAR612)由本实验室分离并保藏。

pNZ44质粒(乳杆菌穿梭质粒)由本实验室保藏。……