张绍武 冯长海

(1. 中国医科大学附属第四医院检验科, 沈阳 110032; 2. 上海皓信生物科技有限公司， 上海 201109)

甲真菌病是皮肤科常见的疾病之一，多数甲真病患者病情顽固，易交叉感染和复发，需要长期治疗，因此明确诊断尤其重要。直接镜检法及培养法为临床常用的真菌检查方法，培养法费时费力。镜检法主要有KOH湿片镜检和荧光镜检，KOH湿片镜检法因操作简单快捷、成本低廉，为实验室普遍采用，但该法阳性率不高[1-2]。荧光染色法检出率较高但需要荧光显微镜[3-4]。芝加哥天蓝染色法检测文献报道不多[5]，本试验通过改良芝加哥天蓝染色法(即芝加哥天蓝甘油染色法)和芝加哥天蓝染色法对疑似真菌感染的甲标本检测进行评估。

1 材料与方法

1.1 试剂

10% KOH(自制)，芝加哥天蓝染色液(芝加哥天蓝1 g，蒸馏水100 mL)，改良芝加哥天蓝染色液(芝加哥天蓝1 g，甘油20 mL，蒸馏水80 mL)。

1.2 仪器

OLYMPUS显微镜(日本，普通光源型号CX41FR)，Olympus EP50显微成像系统(德国)。

1.3 标本

200例皮肤科门诊疑似甲真菌病患者提供的患处甲屑。

1.4 方法

将疑似甲真菌病患者病甲屑用75%酒精消毒清洗后取适量甲屑置于一个0.6 mL的无菌离心管中，加10% KOH溶液致甲屑完全浸没，静置10 min备用。芝加哥天蓝染色法和芝加哥天蓝甘油染色法的操作为：上述10% KOH溶液处理过的甲屑溶解液振荡摇匀后各取理过的甲屑溶解液5 μL依次置于2块载玻片中央，上面分别加入5 μL芝加哥天蓝染色液或芝加哥天蓝甘油染色液，用加样枪头搅拌均匀后盖上盖玻片后镜检；镜检时间分别为盖上盖玻片后1 min、4 h、8 h、24 h、1周。……