细菌超声分散计数仪在结核分枝杆菌最小抑菌浓度检测中的应用
2021-06-26郁晨蕾王莉莉沈旭晖张阳奕
郁晨蕾,江 渊,李 静,王莉莉,陈 炜,沈旭晖,张阳奕
(上海市疾病预防控制中心结核病检测实验室,上海 200336)
耐药结核病(resistant tuberculosis,R-TB)的防治是我国结核病防治工作中的难题之一,随着GeneXpert MTB/RIF检测系统在疑似肺结核病患者检测中的广泛应用,越来越多的利福平耐药结核病(rifampicin-resistant tuberculosis,RR-TB)患者被确诊[1]。一线、二线抗结核药物的体外药物敏感性试验在个体患者的治疗和人群结核病的防控中都起着重要作用[2]。TREK Sensititre MYCOTB药敏板(简称MYCOTB,美国赛默飞世尔公司)可测定12种一线、二线抗结核药物的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),相较于传统固体比例法药物敏感性试验,有着耗时少、单次可检测多种药物、药物敏感性试验结果更精细等优点[3-5]。因MYCOTB在需要判读多个孔内细菌的生长情况时对细菌的接种量有着极其严格的要求,使其在临床应用上存在双人判读结果不一致和重复试验结果不一致的问题。
MYCOTB操作手册建议采用玻璃珠振荡研磨法对菌株进行研磨分散,用配套浊度仪定量,菌悬液需要多次稀释定量以达到目标浓度。接种于药敏板的菌液终浓度受人为因素影响较大,多次稀释容易产生大量气溶胶,存在实验室生物安全隐患。细菌超声分散计数仪利用超声波分散原理,可以实现细菌分散与浊度检测的同步,快速、简单、安全[6]。本研究将细菌超声分散计数仪应用于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)药物敏感性试验,对比2种菌悬液制备方法的效果,通过肉眼观察、抗酸染色镜检、药敏板中菌落形态和药物敏感性试验结果,评估细菌超声分散计数仪在MTB MIC检测中的应用价值。……
