梁马可 李学民 孙蕾 马保东 吕朋举 岳寒

1郑州大学附属郑州中心医院肝胆胰外科，郑州 450000；2郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心，郑州 450000；3河南省人民医院干细胞再生医学中心 ，郑州 450000

研究表明，树突状细胞(dendritic cells，DCs)作为机体最重要的抗原提呈细胞，参与胰腺炎的发生和发展[1]。Toll样受体(toll-like receptors，TLRs)是一类跨膜模式识别受体，可通过识别不同的病原体相关分子模式(pathogen associated molecular patterns，PAMPs)及损伤相关分子模式(damage associated molecular patterns，DAMPs)激活固有免疫细胞，参与炎症反应。内毒素及炎症因子可与DCs表面的TLR4识别并结合，促进DCs的成熟并通过经典的TLR4/IKKα/NF-κB/COX-2促炎信号通路引起炎症级联放大反应，从而导致全身炎症反应综合征[2]。人脐带间充质干细胞( human umbilical cord-mesenchymal stem cells，hUC-MSCs)属于干细胞家族的重要成员，不但具有自我更新和多向分化潜能[3]，还具有低免疫原性及免疫调节功能[4-5]，能够抑制DCs的成熟、分化及诱导调节性树突状细胞(regulatory DCs, regDCs)参与免疫调节。但hUC-MSCs对SAP患者DCs的影响尚不清楚。有研究认为hUC-MSCs可以通过分泌抗炎细胞因子、抑制促炎细胞因子及减轻组织损伤来治疗SAP[6-7]，但其是否通过抑制TLR4/IKKα/NF-κB/COX-2通路调控炎症仍需进一步探究。本研究旨在探讨体外hUC-MSCs对SAP患者DCs的免疫调节作用及其调控通路，以期为SAP的临床治疗提供新的思路。

材料与方法

一、hUC-MSCs的分离、培养和鉴定

采集郑州大学附属郑州中心医院行剖宫产的足月胎儿脐带4～5 cm， PBS充分洗涤，去除血管内残留血液，无菌条件下分离取出脐带外膜组织和血管组织，获得脐带wharton胶组织，将其尽量剪碎，用0.1% Ⅰ型胶原酶(美国Gibco公司)37℃消化4 h后200目筛网过滤。……