李 祯，郭妍婷，陈俊贞，胡新艳，赵新艳，董文丽，贺渊秀，王万顺，李泽宇，姚 刚，冉多良，付 强，史慧君

(新疆农业大学 动物医学学院，新疆 乌鲁木齐 830052)

牛病毒性腹泻/黏膜病(bovine viral diarrhea/mucosal disease，BVD/MD)，简称牛病毒性腹泻病，是由牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)感染引起的接触性传染病，感染动物常表现出高热、腹泻、白细胞减少、免疫抑制、黏膜充血等临床症状，还能引起奶牛产奶量下降、孕牛流产、产死胎以及牛的持续性感染[1-3]。BVDV可通过血液、排泄物等多种途径水平传播，感染BVDV的牛发病率高、病死率低，牛群中相当一部分是BVDV的携带者。BVDV还可垂直传播，感染孕牛产下的犊牛终身带毒，持续排毒，是重要传染源，同时也是生物制品、血清、冻精的主要污染源，对养牛业危害极大[4]。

BVDV毒株有2种生物型，分别为非致细胞病变(non cytopathic,NCP)生物型和致细胞病变(cytopathic,CP)生物型[5]。CP型BVDV接种细胞可使细胞出现病变，具体表现为细胞聚集、拉网、空泡、核固缩等现象。BVDV 5′UTR的核苷酸序列呈高度保守性，常利用其核苷酸序列设计特异性引物，以此对BVDV进行检测和分型鉴定。

本试验在分离BVDV新疆地方株的基础上，对5′UTR基因进行克隆与序列分析，从而了解BVDV新疆株基因型及致病性，为疫病的诊断及致病机制研究提供依据。

1 材料与方法

1.1 细胞系、病毒株及样品MDBK细胞为本实验室保存；BVDV-TC新疆塔城分离株由新疆农业大学动物医学学院冉多良教授惠赠[6]；样品为新疆博乐地区某养牛场出现腹泻症状的病牛新鲜粪便样品，-80℃保存。

1.2 主要试剂及仪器马血清HS、Trypsin及高糖DMEM、青-链抗生素均购自BI试剂公司；……