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脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备及间接竞争ELISA方法建立

2021-06-21孙亚宁李青梅杨苏珍胡骁飞杨继飞张颖硕陈琳琳邢云瑞邓瑞广张改平

中国兽医学报 2021年4期
关键词:小鼠检测方法

孙亚宁,李青梅,杨苏珍,胡骁飞,杨继飞,张颖硕,陈琳琳,邢云瑞,邓瑞广,张改平,2*

(1 河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002;2河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002)

脱氧雪腐镰刀菌烯醇又称呕吐毒素(deoxynivalenol,DON),是一种主要由曲霉、青霉及镰刀菌产生的单端孢霉烯族真菌毒素,在大麦、玉米、小麦、燕麦、黑麦等谷物、谷物制品及饲料中广泛存在[1-2],主要与小麦赤霉病和玉米穗腐病的发生有关,在我国长江、淮河、黄河等流域呈现多发态势[3],普通的加工和烹饪对其浓度没有显著影响[4]。DON的毒害作用主要干扰蛋白质和DNA的合成[5],引起动物厌食症、呕吐、肌肉及肠出血、细胞毒性和免疫毒性等[6],且与黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)等真菌毒素有协同毒性[7],严重危害动物[8]和人类身体健康,影响我国农业、畜牧业及食品安全的健康发展。很多国家对DON制定了严格的限量标准,我国《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量标准》中对谷物及其制品中DON的限量标准为不大于1 000 μg/kg[9]。能够快速准确的检测DON污染,是控制其危害的最有效手段。DON常用的检测方法有薄层色谱法、高效液相色谱等大型仪器法及免疫学快速检测方法等。薄层色谱法[10]主要用于快速定性检测,检测灵敏度较低;高效液相色谱等[11]大型仪器法检测结果准确,为我国国标规定的仲裁法,但耗时较长且价格昂贵,不适合快速筛查;免疫学快速检测方法主要包括酶联免疫吸附测定(ELISA)[12]、免疫层析法[13]、免疫传感器法[14]等,由于具有快速、灵敏、特异、稳定、特别是操作简单等特点,已经普遍应用于真菌毒素的快速检测中[15-16]。……

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