黄润英,范智利,肖吉群,郑 巍,蔡 强

(宜宾市第二人民医院儿科, 四川宜宾 644000)

病理性新生血管增生造成的早产儿眼部疾病,已成为当今发展中国家和发达国家儿童失明的主要原因, 氧诱导视网膜病变( oxygen-induced retinopathy, OIR)小鼠模型是目前与新生血管增生较为类似模型,且最常见[1];及早治疗可有效改善视功能, 目前抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)治疗已具有满意效果[2],合适的抗VEGF 是治疗的关键。 多种促血管微小RNA(microRNA, miRNA)和抗血管miRNA 共同调控血管新生,引起 VEGF 异常表达[3]。 miR-20a-5p 是miR-17-92 家族成员之一,抑制 miR-17、miR-20 可增加血管生成[4],miR-20a-5p 表达水平影响炎症反应、细胞增殖、细胞凋亡、组织修复、细胞外基质重塑、血管新生以及恶性病变等多种病理机制[5],且在第37 届圣安东尼奥乳腺癌研讨会上已作为抗VEGF 因子用于治疗乳腺癌[6],但是否可用于OIR 治疗尚不清楚。 因此,建立 OIR 模型,观察miR-20a-5p 对OIR 小鼠的影响并初步探讨其机制,为OIR 靶向治疗提供一定参考。

1 材料和方法

1.1 实验动物

健康无特定病原体动物(specific pathogen free,SPF)级 96 只 C57BL/6J Nifdc 新生小鼠 7 日龄,体重(5.2±0.5)g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司[SCXK(京)-20180045],雌雄不限。 所有动物在宜宾市第二人民医院动物饲养中心动物饲养[SYXK(京)-2019-0105],并经本院伦理委员会批准(IACUC-20190018),实验过程符合3R 原则,且遵守视觉与眼科学研究会制定的关于科研动物规范。

1.2 主要试剂与仪器

miR-20a-5p agomir 购自广州锐博生物科技有限公司;引物均由上海生工生物工程股份有限公司合成;实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)试剂盒购自赛默飞世尔,货号:K1622;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色试剂盒购自碧云天科……