樊燕鑫 夏天卫 沈计荣△

膝骨关节炎(Osteoarthritis,OA)在骨科临床常见，其发病机制仍不明确且无良好疗法[1]。温肾宣痹方是诸方受教授创制的名方，临床应用广泛[2-4]。其治疗骨与关节退行性疾病[5-7]，及膝骨关节炎有较好疗效，但作用机制尚不清晰。膝骨关节炎的主要病理特征是软骨破坏，研究表明基质金属蛋白酶在膝骨关节炎关节软骨细胞外基质的降解及重构过程中发挥重要作用[8]，且前人发现miR-146a高表达能抑制NF-κB信号通路，延缓OA[9-10]，故设计实验探讨温肾宣痹方治疗膝骨关节炎的潜在分子机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SPF级SD大鼠(200～220 g)24只，上海西普尔-必凯实验动物有限公司(中国)，动物许可证批号为SCXK(沪)-2018-0006。

1.2 实验药物及试剂

水合氯醛(C104202，阿拉丁试剂(上海)有限公司，中国)；4%多聚甲醛(G1101，武汉谷歌生物科技，中国)；PBS(G002，赛维尔生物科技有限公司，中国)；番红-固绿染液(G1005，武汉谷歌生物科技，中国)；油红O(A600395，生工生物工程上海(股份)有限公司，中国)；异丙醇(A0004338，上海润捷化学试剂有限公司，中国)；无水乙醇(A0010074，上海润捷化学试剂有限公司，中国)；二甲苯(A0000542，上海润捷化学试剂有限公司，中国)；中性树脂(E675007，生工生物工程上海(股份)有限公司，中国)；0.9%生理盐水(H37022337，辰兴药业股份有限公司，中国)。纯净水(LA0727，飞净生物科技有限公司，中国)。温肾宣痹方：附子、桂枝、狗脊、细辛、茯苓、生薏苡仁、木香、天麻、山茱萸、泽泻、白术、生甘草的比例为 10∶10∶10∶10∶12∶15∶10∶10∶10∶10∶10∶10，由江苏省中医院制剂部提供。

1.3 实验仪器

microCT(skyscan1172，Bruker，比利时)；X-线放射仪(MX-20，Faxitron，美国)；生物洁净安全柜(BHC-1300 ⅡA/B3，苏州净化设备有限公司，中国)；脱水机(JJ-12J，武汉俊杰电子有限公司，中国)；……