脂肪干细胞与富血小板血浆治疗大鼠膝骨关节炎疗效比较
2021-06-15楼袁美严佳民邱天文杨锦荧单乐天
楼袁美 严佳民 邱天文 杨锦荧 单乐天*
膝骨关节炎(KOA)是一种常见的慢性和进行性骨代谢疾病,是影响老年人生活质量并引起疼痛反复发作甚至残疾的常见原因之一。目前尚无治愈KOA的方法,大多数研究旨在减轻痛苦和防止功能衰退[1]。富血小板血浆(PRP)是可作用于自体的浓缩血小板。PRP提供的超生理量的必需生长因子可提供再生刺激,促进低愈合潜力组织的修复[2]。脂肪干细胞(ADSCs)通过释放多种生长因子和细胞因子而起到旁分泌、抗炎和免疫调节功能,具有显著的成软骨作用[3]。研究证明,PRP和ADSCs均可起到治疗和修复骨关节炎的作用。本研究旨在比较PRP和ADSCs对KOA病变中疼痛和软骨损伤的影响,以寻求医治膝骨关节炎最佳的措施。
1 材料与方法
1.1 实验动物 雄性SD大鼠32只,无特定病原体(SPF)级,由上海斯莱克实验动物有限公司提供,体重(200±20)g,生产许可证号:SCKK(沪)2007-0005,在浙江中医药大学动物实验中心进行实验。实验过程符合医学动物实验伦理委员会标准。实验时间2019年6 月至2020年1月。
1.2 试剂及仪器 IMDM液体培养基(美国sigma公司),戊巴比妥钠,PBS磷酸盐缓冲液(赛默飞世尔生物化学制品有限公司),胎牛血清,青链霉素混合液,0.25%胰蛋白酶-EDTA,Ⅳ型胶原酶(美国Worthington)碘乙酸(美国sigma公司),0.9%氯化钠注射液(中国),4%甲醛溶液,EDTA脱钙液(中国Solarbio公司),足底热辐射测痛仪(西安峰岚仪器厂),DK-S12型恒温水浴锅(上海森信实验仪器有限公司),SW-CJ-1F层流超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司),AXiovent200荧光倒置显微镜(BX20)(日本Olympus公司),德国Eppendof冷冻离心机(5804R)(上海艾本德中国有限公司),全自动多功能酶标仪(美国BioTek公司),YLS-3E电子压痛仪(安和盟天津科技发展有限公司),CO2细胞培养箱(3111)(美国Thermo公司)。……
