不同粗糙度钛表面形貌对人牙龈成纤维细胞黏附及整合素α5基因表达的影响
2021-06-15吕吉利宣丽娜冯丹峰黎红
吕吉利 宣丽娜 冯丹峰 黎红*
种植义齿具有“人类第三幅牙齿”之称[1],是目前最受欢迎的缺牙修复方式之一。近期研究发现种植术后种植体周围炎以及种植体周围黏膜炎发生率达19.83%和46.83%[2],是导致种植体失败的主要原因之一。种植体-软组织界面的结缔组织具有支持、免疫监控、促进修复等作用[3],研究表明种植体周围软组织封闭水平弱于天然牙[4],这种较弱的软组织封闭水平可能是导致种植体失败的原因之一。整合素作为牙龈成纤维细胞黏附过程中重要的蛋白,较多研究证实通过不同的种植体表面处理方式可以促进整合素的基因表达,其中物理改性是较为安全稳定的方法之一[5]。本文探讨不同粗糙度钛表面形貌对人牙龈成纤维细胞黏附及整合素α5基因表达的影响。
1 材料与方法
1.1 主要试剂及材料 无水乙醇、蒸馏水、37%浓盐酸、浓硫酸、氧化铝细砂(绿新源)、钛圆盘(柏泰)、PBS溶液(诺森德)、0.25%胰蛋白酶(Gibco,美国)、胎牛血清(四季青)、CCK8试剂盒(碧云天)、DMEM培养液(Gibco,美国)、Trizol(Takara)、反转录试剂盒(Takara RR047)、PCR试剂盒(Takara RR420)。
1.2 试件制备及表征 将直径15 mm、高度1 mm的100枚钛圆盘随机分为A组、B组、C组及D组,A组采用机械抛光处理,记为Ti组,B组、C组及D组分别采用直径45 µm、125 µm及250 µm的氧化铝细砂进行表面喷砂处理(JNSP-Ⅰ型湿喷砂机,压力:0.4 MPa,距离7 cm,时长:1 min)。将所得钛圆盘经蒸馏水冲洗、超声20 min后进行热酸蚀处理。B组采用低浓度混合酸(60% H2SO4:10% HCL:蒸馏水按1∶1∶2混匀)100 ℃水浴20 min,蒸馏水冲洗后分别经蒸馏水、75%乙醇、蒸馏水超声10 min,高温高压蒸汽灭菌后保存备用,记为Ti45组。C组及D组采……
