张玉霞*，梁琼，黎渊珠，邹亚男，薛梅，梁丽琴

1. 海南工商职业学院海洋学院（海口 570203）；2. 海南省食品药品检验所海口分所（海口 570311）；3. 海南科技职业大学化学与材料工程学院（海口 571126）4. 山西师范大学生命科学学院（临汾 041004）

胰蛋白酶是人体及动物体内普遍存在的一种蛋白水解酶[1]，胰蛋白酶在pH 5.0时最稳定，可在低温下贮存数周而不丧失活性；低于此pH时酶易变性；当pH 高于5.0时，酶易自溶而失去活性[2-3]。胰蛋白酶能催化蛋白质的水解，对有碱性氨基酸（如精氨酸、赖氨酸）的羧基所组成的肽键有着高度的特异性[4]。胰蛋白酶不仅能水解肽键，而且也能水解酰氨键和酯键[5]。对其催化水解活性的敏感度为酯键＞酰铵键＞肽键[6]。用其来水解提取绿豆中的蛋白质，所得到的蛋白质有利于人体的吸收消化[7]，并可以直接用于制作饮料、果冻、糕点等食品，且无其他副作用，可促进食品工业的发展。

试验以绿豆磨粉为原料，用胰蛋白酶进行酶解，在酶解pH、温度（T）和[酶]/[底物]（[E]/[S]）等单因素试验基础上，对水解条件进行正交试验，以确定胰蛋白酶提取绿豆蛋白的最佳条件。然后，对在最佳提取条件下得到的绿豆蛋白溶液进行凝胶过滤层析法纯化，最后用纯化的绿豆蛋白样品做SDS-PAGE电泳，测得其中所含的蛋白质的分子质量。此次试验结果可以为绿豆蛋白的加工和利用提供理论的依据，从而带来很好的经济效益。

1 材料与试验方法

1.1 材料与设备

1.1.1 试剂与材料

绿豆磨粉（临绿一号绿豆，九阳料理机磨粉）；胰蛋白酶（USA进口、上海化学试剂站分装厂）；……