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miR-27a-3p调控XIAP表达对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖和凋亡的影响*

2021-05-29杨夏茵薄海美

重庆医学 2021年9期
关键词:实验检测

刘 牧,杨夏茵,薄海美

(1.华北理工大学附属医院儿科,河北唐山 063000 ;2.华北理工大学临床医学院心血管,河北唐山 063000)

急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)是一种常见的血液系统恶性肿瘤,主要由T细胞恶性克隆性增殖转化所导致,分别占儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)、成人ALL患者的10%~15%、25%[1];目前,化疗是T-ALL治疗的主要方式,但生存率和预后效果均不太理想[2]。微小RNA(miRNA)是细胞内重要的一类基因调控因子,在肿瘤发生、发展过程中起着重要作用。miR-27a-3p是一种与肿瘤发生、发展密切相关的miRNA,可通过调控细胞增殖和凋亡等在膀胱癌、乳腺癌和胃癌等癌症中发挥着重要的抑癌或致癌作用[3-5]。有研究指出,miR-27a-3p在儿童ALL患者血浆和T-ALL细胞中均呈低表达,且miR-27a-3p在前者中可能发挥着重要的抑癌作用,但其在后者中的作用机制并不清楚[6-7]。本研究以T-ALL细胞系Jurkat为研究对象,观察miR-27a-3p对Jurkat细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制,以期为T-ALL的发病机制提供新线索。

1 材料与方法

1.1 材料

人T-ALL细胞系Jurkat(美国ATCC,编号:GD-C24419605),噻唑蓝(MTT)试剂、二甲基亚砜(大连宝生物,编号:M8180、D8371),胎牛血清(杭州四季青生物工程公司,编号:11011-6123),脂质体(Lipofectamine)2000和Trizol试剂(美国Invitrogen,编号:11668、15596026),RPMI-1640培养基、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)凋亡检测试剂盒、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性检测试剂盒和双荧光素酶报告基因(DLR)检测试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,编号:31800、CA1020、BC3830、D0010),BeyoRTTMII cDNA合成试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司,编号:D7170M),荧光定量PCR试剂盒(杭州主诺生物,编号:RT0411-01),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、X染色体连锁的凋亡抑制基因(XIAP)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体(美国Abcam,编号:ab185002、ab32503、ab28151、ab181602)。……

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