人乳腺珠蛋白荧光免疫层析检测方法的建立①
2021-05-27崔云会王云龙李玉林王继创
崔云会 陈 楠 王云龙 明 亮 李玉林 王继创
(郑州大学第一附属医院检验科,郑州 450052)
乳腺癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,近年来在全球范围内发病率呈上升趋势[1]。生物标记物的使用已经成为帮助乳腺癌诊断以及确定预后、预测治疗反应和治疗后监测的一种方法,非侵入性的生物标记物,如血清学分子,与其他类型的生物标记物相比,检测更方便[2-3]。人乳腺珠蛋白(human mamma‑globin,hMAM)是子宫珠蛋白基因家族中的一个乳腺特异性成员,编码定位于染色体11q13上的10kDa糖蛋白[4]。hMAM在乳腺上皮细胞中低表达,在乳腺癌中高表达,已被证明与肿瘤早期发现转移有关[5]。且有研究表明,血液中的hMAM可作为乳腺癌的一个独立预后标志物,并且已成为乳腺癌微转移检测的最特异的标志物之一[6]。本研究以镧系稀土元素Eu3+羧基荧光微球作为标记物,建立hMAM时间分辨荧光免疫层析检测方法,为乳腺癌诊断和治疗监测提供一种快捷、准确且经济的方法。
1 材料与方法
1.1 材料SCGB2A2单克隆抗体购自Abnova公司,Eu3+羧基荧光微球购自Bangs公司,羊抗鼠IgG、hMAM多抗、hMAM室内参考品均由河南省生物工程技术研究中心提供,PVC板购自上海良信公司,硝酸纤维素膜(NC膜)购自Sartorius公司,玻璃纤维棉购自上海金标生物科技有限公司,Human mam‑maglobin ELISA试剂盒购自Cusabio公司,临床样本由郑州大学第一附属医院提供,其他化学试剂均为分析纯。免疫荧光定量检测仪购自杭州峰航科技有限公司,XYZ三维点膜喷金仪、微电脑自动斩切机购自上海金标生物科技有限公司,超微量紫外分光光度计购自Thermo fisher公司,超声波细胞粉碎机购自宁波新芝生物科技股份有限公司,纳米粒度电位仪购自Malvern公司。……
