吴 磊，李国庆，赵宏伟

(平煤神马医疗集团总医院泌尿外科，河南平顶山 467000)

前列腺癌(prostate cancer，PC)是男性中最常见的恶性肿瘤，也是全世界男性癌症相关死亡的第2大主要原因[1]。多西他赛是治疗PC的标准一线化疗药物，并且在转移性去势抵抗性PC(metastatic castration resistant PC，mCRPC)中具有生存优势，但经过长时间的治疗会出现耐药性[2-3]。多西他赛抵抗已经成为临床急需解决的问题之一，约50%的患者对多西他赛的反应较差及最初反应良好而最终产生抗性表型[4-5]。CLDN4是上皮紧密连接的主要组成部分，在上皮性恶性肿瘤中表达增加[6-8]。最近有研究显示，降低CLDN4的表达可提高乳腺癌和胰腺导管癌对化疗的敏感性[9-10]。多项研究显示，PI3K/AKT信号通路传导与肿瘤细胞的耐药相关[11-13]。目前尚不清楚CLDN4是否参与前列腺癌细胞对多西他赛的耐药，是否可通过调节PI3K/AKT信号通路的传导影响前列腺癌细胞对多西他赛的敏感性。因此本文选用PC细胞系，采用转染技术敲低PC细胞中CLDN4的表达，检测CLDN4对PC细胞增殖、凋亡和对多西他赛敏感性的影响及可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料前列腺癌细胞DU145、PC3、LNCaP购于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库，ALVA41和人正常前列腺上皮细胞RWPE-1由其他实验室赠送。RPMI 1640培养基、MTT粉末等购于北京鼎国有限公司；总RNA提取试剂盒、反转录试剂盒购于日本TaKaRa公司；阴性对照质粒(si-NC)、miR-141干扰质粒(siRNA1和siRNA2)由北京华大基因合成；多西他赛购于江苏恒瑞医药股份有限公司；anti-CLDN4、anti-PI3K、anti-p-PI3K、anti-AKT、anti-p-AKT、anti-Bax、anti-Bcl-2抗体均购于abcam公司；BCA蛋白定量试剂盒、凋亡检测试剂盒购于碧云天有限公司。……