韩冬梅，阮可悦，曹云雷，张丽荣，童 武，李国新，郑 浩,，童光志,

（1.中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241；2.扬州大学 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州225009）

长期以来，基因缺失突变株的构建是研究疱疹病毒功能基因的主要策略。1997年，Messerle等[1]首次将细菌人工染色体（BAC）应用于疱疹病毒，成功构建了巨细胞病毒（Cytomegalovirus，CMV）感染性细菌人工染色体克隆。该技术已成为疱疹病毒分子病原学、基因功能研究不可或缺的工具。本研究在伪狂犬病病毒变异毒株JS-2012的感染性克隆pBAC-JS2012及突变筛选菌株SW102-PRVBAC基础上进行IE180启动子的缺失[2]。

伪狂犬病（pseudorabies, PR或Aujeszky’s disease，AD）是一种由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）感染引起的多种家畜和野生动物共患的急性传染病。猪是伪狂犬病病毒的唯一宿主，猪伪狂犬病的暴发和流行给全世界养猪业造成了巨大的经济损失[3-4]。PRV基因组全长约145 Kb，GC含量高达74%左右，包含70多种基因，可编码100多种蛋白，值得注意的是PRV与其他疱疹病毒相比只有一个立即早期基因即IE180与单纯疱疹病毒ICP4基因同源，其在基因组中存在两个拷贝，且大部分序列与病毒潜伏感染相关转录本（large latency transcripts，LLT）重叠，是病毒复制和早期基因转录所必需的。

根据PRV感染后基因转录的时间顺序可将其分为三类：立即早期基因（immediate-early gene，IE）、早期基因（early gene，E）、晚期基因（late gene，L）。IE基因的转录出现在病毒DNA复制之前。IE基因转录后，激活早期基因和晚期基因的表达，引起病毒裂解性感染。IE180是PRV唯一的一个立即早期基因，它的表达不需要任何病毒蛋白的合成，IE180是整个基因表达的反式作用因子[5-7]。……