杜 倩，汪 伟,，韩知晓，孔子荣，辛佳亮，闭璟珊,曹 亮，孙文超,4，胡传活，郑 敏

（1.广西大学动物科学技术学院，南宁530004；2. 广西壮族自治区动物疫病控制中心，南宁530000；3.军事科学院军事兽医研究所，长春130122；4.温州大学病毒学研究所，温州325035）

猪德尔塔冠状病毒（Porcine deltacoronavirus，PDCoV）是冠状病毒科（Coronaviridae）德尔塔冠状病毒属（Deltacoronavirus）成员[1-3]，其病毒粒子呈球形或多形性，基因组大小为25.4～ 26.6 kb，包含至少7个开放阅读框[4]。

2012年，Woo等[5]首次从香港地区猪腹泻样品中检测到PDCoV，随后美国、加拿大、泰国和韩国等国家也相继从临床样本中检测到PDCoV[4,6-9]。方谱县等[10]对多个国家和地区的PDCoV基因组序列进行了比对分析，发现不同地区的PDCoV毒株之间核酸同源性较高，表明PDCoV可能具有相同的起源。资料显示，PDCoV对不同日龄、性别和品种的猪均有致病性，对哺乳仔猪的致病性最强，病死率高达30%[11]。此外，PDCoV常与猪流行性腹泻病毒（Porcine epiddmic diarrhea virus，PEDV）和传染性胃肠炎病毒（Porcine transmissible gastrpenteritis virus，TGEV）混合感染，临床上表现为腹泻、呕吐、脱水以及食欲衰退等症状[1,12-14]。临床剖检可见病猪多脏器出现实质性病变，尤其是小肠部位病变最为严重，肠绒毛皱缩、肠壁变薄以及肠腔内存在大量黄色液体[4,10,15]。

为了能更好的了解广西地区PDCoV流行情况和分子遗传变异情况，本研究初步建立了针对PDCoV S基因的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法，并对该方法进行验证和初步应用，结果证明该方法操作简单、灵敏度高、特异性强和重复性好。

1 材料与方法

1.1 病毒和试剂 猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒的阳性样品由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心采集并保存；……