吴 倩，张建华，郝永清

（内蒙古农业大学兽医学院 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，呼和浩特 010018）

牛传染性鼻气管炎（bovine infectious rhinotracheitis，IBR）是由牛传染性鼻气管炎病毒（Bovine infectious rhinotracheitis virus，IBRV）引起的接触性传染病，给我国的规模化养牛业带来严峻的考验。Liess等[1-2]报道IBRV第一次于联邦德国分离得到，并且由其引起的IBR在欧美牛群中广泛存在。一般讲，IBR分急性和慢性病例，病的后期往往难以分离出病毒。另外，慢性病例如有细菌性并发感染，易于诱发肺脓肿病。还有些病牛症状似牛恶性卡他热（bovine malignant catarrhal fever，BMC），其病原是牛疱疹病毒，这就需要用检测特异性抗体和分离病毒的方法来确诊[3-4]。IBRV是一种具有囊膜结构的双股DNA病毒，且以糖蛋白形式存在于囊膜表面或囊膜内。gE蛋白携带着某些蛋白质代谢去向信息，在细胞识别、信号传递中起着关键作用，同时gE糖蛋白还是非常重要的免疫原，在某些病毒粒子中可刺激机体产生中和抗体。gE基因是生物体内外复制的非必需糖蛋白，缺少该基因不会影响病毒在体内的复制能力。gE基因全长为1700 bp，共编码566个氨基酸[5-6]。本研究对牛传染性鼻气管炎病毒gE基因的原核表达产物为抗原建立了gE-ELISA检测方法，为进一步对牛传染性鼻气管炎的鉴别诊断和防控提供了重要技术支持[7]。

1 材料与方法

1.1 病毒、血清与载体 IBRV NMHS-1毒株、pCold-TF质粒由内蒙古农业大学兽医微生物实验室保存；IBRV标准牛阴性血清、阳性血清均购自中国兽药监察所。

1.2 菌种与试剂 E.coli Top10、E.coli Transetta（DE3）感受态细胞、Trans2000 DNA marker均购自北京全式金生物技术有限公司；……