高晓龙，王英超，李 月，沈光年，刘晓冬，周德刚，梅 力，冯小宇

（1.北京市动物疫病预防控制中心，北京102600；2.北京市兽药监察所，北京102629）

猪瘟（classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起的一种高度接触性传染病。其在家猪和野猪中广泛传播，严重威胁猪养殖业，被世界动物卫生组织（World Organization for Animal Health，OIE）列入OIE疫病名目[1]，为必须申报的法定传染病，也是我国农业农村部规定的一类传染病[2]。

近年来，我国猪瘟病毒的感染病例多呈现非典型性临床症状和病理剖检变化，其典型特征与当下我国广泛流行的非洲猪瘟极其相似，表现为发热、全身广泛性小点出血、便秘腹泻、脾梗死等。因此，必须通过实验室诊断进行鉴别。目前已有的检测方法包括ELISA、普通PCR、实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，qPCR）、环介导等温技术（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）[3]、重组酶扩增酶检测技术（recombinase polymerase amplification，RPA）[4]等，但以上方法均存在灵敏度不够，出现假阳性或假阴性的情况。

数字PCR( digital PCR，dPCR）属于第3代PCR，最早出现于1999年[5]，其中微滴式数字PCR（droplet digital PCR，ddPCR）技术是近年来广泛用于标准物质定量的核酸检测技术。与传统的qPCR相比，ddPCR通过统计学原理直接给出浓度，其结果不再依赖于Ct值[6]，避免了在低拷贝数、细微模板浓度差异中灵敏度和精确度的缺陷，能够实现绝对定量。Yan等[7]采集了10个感染H7N9的患者不同治疗时期的样本，分别进行qPCR及ddPCR检测，发现对于qPCR阴性的样本，ddPCR仍可以检测出病毒的存在，说明ddPCR的灵敏度远高于qPCR。ddPCR不仅可以对病原体定性，而且还能对病原体DNA或RNA序列进行绝对定量，从而对疾病进行早期诊断、药物疗效观察、病情判断及预后观察，目前dPCR技术已广泛的应用于乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus,HBV）、艾滋病病毒（Human immunodeficiency virus，HIV）、甲型流感病毒等临床领域[8]。……