卵巢肿瘤结构域蛋白3敲除小鼠黑质区核因子κB相关炎症因子表达的变化及其机制

2021-05-19高艺峻贾凤菊焦倩陈曦杜希恂姜宏

精准医学杂志 2021年2期

关键词：小鼠

高艺峻贾凤菊焦倩陈曦杜希恂姜宏

(青岛大学国家生理学重点(培育)学科，山东青岛 266071)

卵巢肿瘤结构域蛋白3(OTUD3)是去泛素化酶(DUBs)家族OTU亚家族中的一个成员，位于人类染色体1p36.13[1-2]。OTUD3不仅被证实参与肿瘤的发生发展[3-5]，还可以通过抑制线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)Lys63位的多聚泛素化，进一步抑制MAVS的聚集，切断视黄酸诱导基因1(RIG-1)样受体(RLR)信号通路上的先天抗病毒免疫应答，从而限制了先天抗病毒免疫信号的传导[6-7]。为了更加全面地了解OTUD3对先天免疫应答中核因子κB(NF-κB)相关炎症因子的影响，本研究选用24月龄OTUD3敲除(OTUD3-/-)雄性小鼠及其同窝野生型(WT)雄性小鼠各3只，对6只小鼠的中脑黑质组织进行转录组学测序(RNA-seq)分析，筛选出差异表达基因(DEGs)，并通过KEGG通路富集分析可能参与先天免疫和神经炎症相关的信号通路，同时采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验对筛选出的DEGs进行mRNA水平的验证，旨在探讨OTUD3对NF-κB相关炎症因子表达的影响，以及OTUD3参与调控神经炎症反应的作用机制。现将结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 实验动物与分组

24月龄OTUD3-/-雄性小鼠3只，同窝WT雄性小鼠3只，体质量(30±2)g，均由中国人民解放军军事科学院军事医学研究院生命组学研究所、国家蛋白质科学中心(北京)提供。实验动物分为WT组与OTUD3-/-组，小鼠在室温(23±1)℃，湿度(50±10)%，12/12 h昼夜循环光照条件下饲养，并自由饮水、进食。所有动物的处理均遵循医学伦理及原则，伦理编号：201810OTUD3-/-3WT32019-03012。