罗 静，王培军

(同济大学附属同济医院医学影像科，上海 200065)

阿尔茨海默病(Alzheimer disease， AD)隐匿发病、进行性发展，其病理主要改变为脑内β淀粉样蛋白(amyloid β-protein， Aβ)沉积形成的老年色素沉着(senile pigmentation， SP)和Tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结(neurofibrillary tangle， NFT)[1]。目前AD带来的社会问题日趋严峻[2]，临床迫切需要能够早期诊断的检查方法。多种成像探针现已问世[3-4]，其中基于Aβ的核医学探针如11C-PiB、18F-Flutemetamol及18F-Florbetaben等已用于临床，但因其存在电离辐射、半衰期较短及成本较高等问题，临床推广受限。本课题组前期成功构建的新型靶向Aβ的KB探针为18F-Florbetaben衍生物，通过保留18F-Florbetaben主体双苯环结构并对其进行修饰，获得了可透过血脑屏障(blood brain barrier， BBB)与Aβ结合且无电离辐射的新型探针。本研究拟构建结合KB探针、以聚乙二醇(polyethylene glycol， PEG)修饰的磁性四氧化三铁及靶向药物姜黄素(curcumin, Cur)的复合纳米材料，通过体外实验观察其用于早期诊断AD的可行性。

1 材料与方法

1.1 实验材料与动物 KB探针[E-1-(4-(4-甲胺基-苯乙烯基-苯氧基)-3,6,9,12,15,18,21,24-八氧杂庚酸-27-酸](宁波康贝生化有限公司)，二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-甲氧基-聚乙二醇 2000(distearoyl phosphatidylethanolamine-methoxy PEG 2000， DSPE-mPEG 2000)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-PEG-氨基(distearoyl phosphatidylethanolamine-PEG-NH2， DSPE-PEG-NH2)、Cur粉末、2-吗啉乙磺酸[2-(4-Morpholino)ethanesulfonic acid， MES]、水溶性碳二亚胺[1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydroc， EDC](南京东纳生物科技有限公司)，兔源抗Aβ抗体(4G8、6E10)(Covance)，碱性磷酸酶标记的山羊抗兔IgG二抗(Sigma Aldrich)及马-达二氏犬肾(Madin-Darby canine kidney， MDCK)细胞(中国科学院上海生命科学研究院)等。

无特定病原体(specific pathogen free, SPF)级APP/PS1雄性转基因小鼠10只，3月龄，体质量(25±5)g，购于南方模式生物科技股份有限公司，许可证编号：SCXK(沪)2017-0010，饲养于18～22℃、相对湿度60%～80%、12 h昼夜交替环境，自由采食、饮水。本研究通过院伦理委员会批准[伦理编号：2019-DW-(005)号]。……