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食品中沙门氏菌FTA膜结合跨越式滚环等温扩增检测方法的建立

2021-04-27庄梦晴张先舟卢鑫郭威马晓燕张伟

现代食品科技 2021年4期
关键词:检测方法

庄梦晴,张先舟,卢鑫,郭威,马晓燕,张伟,,3

(1.河北农业大学食品科技学院,河北保定 071001)(2.河北农业大学理工学院,河北沧州 061100)(3.河北农业大学生命科学学院,河北保定 071001)

沙门氏菌是一种人畜共患的致病菌。由沙门氏菌引起的食品中毒大多是由于其穿透胃肠粘膜致使细胞死亡造成的[1],根据临床表征可以分为胃肠炎型、类伤寒型、类霍乱型、类感冒型和败血症型[2]。在所有食源性致病菌引起的食物中毒事件中,沙门氏菌引起的食品安全事件居首位,具有高检出率、高发病率和高死亡率的特点[3]。数据调查发现,全球各个国家均存在不同程度的沙门氏菌污染问题[4,5],由此引发的沙门氏菌相关疾病,对公众安全产生了严重的威胁,造成了巨大的经济损失[6]。

微生物的传统培养方法检测时间较长,对实验操作人员、周围背景及设备的无菌环境都有很高的要求,并且无法实现现场检测[7]。当细菌处于活的不可培养(Viable but non culturable,VBNC)状态时,会造成结果误判[8]。免疫学方法特异性抗体的制备复杂[9],当出现抗原或抗体的相似结构时,会影响检测的特异性和重复性[10],甚至造成最终结果的误判[11]。随着核酸体外扩增技术的不断发展,逐步建立了聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)[12]、多重PCR(Multiplex PCR)[13]、实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)[14]等变温扩增技术,这些技术均需要复杂的热循环系统,仪器昂贵,限制了其在基层现场检测中的应用。为克服上述技术的缺点,研究人员创新性的发展了滚环扩增(Rolling circle amplification,RCA)和环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)等核酸等温扩增技术。……

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