徐子寒，彭云，董世强，侯定坤，王海涛△

前列腺癌（prostate cancer，PCa）是男性第2大常见恶性肿瘤，2018 年全球新确诊PCa 患者127.6 万例，死亡 35.9 万例［1］。中国男性的 PCa 发病率也在快速上升［2］。大多数PCa 患者在确诊时已经出现远处转移，治疗手段局限于内分泌治疗和放疗。凋亡抑制蛋白家族（inhibitor of apoptosis protein，IAPs）在调控细胞周期和肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用［3］。生存素（Survivin）是IAPs 家族中分子质量最小的成员，在结直肠癌［4］、胰腺癌［5］、肝癌［6］等多种肿瘤组织中广泛表达。早期研究发现Survivin 在PCa 中参与去势抵抗［7−8］，抑制细胞凋亡［9−11］。目前已发现在卵巢癌［12］和肾癌［13］中，Survivin 通过促进肿瘤细胞上皮−间质转化（EMT）进程来增加肿瘤的侵袭性。转化生长因子（TGF）−β/Smad 作为参与肿瘤细胞EMT进程的经典通路［14−15］，在乳腺癌［16］、肺癌［17］中发挥促进转移的作用。因此，笔者推测Survivin可通过调节TGF−β/Smad通路促进肿瘤细胞发生EMT，进而促进PCa 的转移。本文旨在阐明Survivin 在PCa 转移中所发挥的作用。

1 材料与方法

1.1 主要材料 （1）组织标本。选取2018年1月—2019年1月天津医科大学第二医院和天津市泌尿外科研究所收集的15例良性前列腺增生（BPH）活检标本和60例PCa活检标本，60 例 PCa 中 Gleason 分级为 6、7、8、9+10 者各 15 例。（2）细胞及主要试剂。人前列腺增生上皮细胞株BPH 购自天津市泌尿外科研究所，人PCa 细胞株LNCaP、Du−145、PC−3 均购自美国模式菌种收集中心（ATCC）。RMPI−1640 培养基、胎牛血清（FBS）购自美国Gibco 公司。青/链霉素（100×）、总蛋白提取试剂、PMSF 溶液、BCA 蛋白浓度测定试剂盒、Western blot 相关试剂购自北京索莱宝生物技术公司。兔抗人TGF−β1、Smad2/3、磷酸化Smad2/3（pSmad2/3）、Smad4、GAPDH 一抗购自英国Abcam 公司。Survivin、上皮细胞钙黏素（E−cadherin）、神经钙黏素（N−cadherin）、羊抗兔二抗购自武汉三鹰生物技术有限公司。……