两种方法提取高原地区人血液DNA 效果的比较
2021-04-23张诗璇宋佳颖梁贞多吉卓玛央拉巴桑卓玛
中国生物制品学杂志 2021年4期
关键词:方法
张诗璇 ,宋佳颖 ,梁贞 ,多吉卓玛 ,央拉 ,巴桑卓玛 ,3
1.西藏大学高原医学研究中心,西藏拉萨850000;2.复旦大学生命科学学院,上海200000;3.中国藏学研究所(珠峰研究院),西藏拉萨850000
进行基因组学的研究,需获取高纯度的基因大分子[1-3],而高原地区由于压力等因素,使得提取试剂受到一定的影响,从而导致提取DNA 的浓度、纯度大幅下降,且DNA 溶液中各种物质的污染较为严重,原因主要是提取方法、试剂剂量以及溶液配制等方面。通常提取DNA 的方法应经济有效,可适用于-20 ℃以下冷冻的血液样本,同时保证DNA 质量[4]。研究表明,溶液沉淀法具有较高的核酸提取量,且DNA 纯度较好[5]。其提取原理[6]主要在于 DNA 的析出,受高原低气压影响,在温度恒定的条件下,气体分子的自由程在低压环境内会增加,分子自由度增加[7],从而导致碰撞概率下降。同样,在DNA 提取液体中均不存在较强的成键离子,因此可排除液体间反作用离子阻力的影响,可近似地将液体离子看作气体分子,同理可得液体中离子的碰撞概率会下降。当碰撞概率下降时,DNA 分子相对不易进行键合作用溶解,这会使DNA 提取纯度及浓度大大下降,杂质含量极大增加,从而影响高原地区分子生物学的自主发展。本研究采用市售人类基因组全血DNA 沉淀法提取试剂盒与本文改良方法分别各提取1 000 例人群全血样本DNA,比较两种方法高原地区DNA提取效果,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 主要试剂及仪器 血液基因组DNA 提取试剂盒(沉淀型)DP318 为市售产品;分光光度计(Thermo-NANODROP 2000)购自美国Thermo 公司;……
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