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干扰素诱导跨膜蛋白2 对脑心肌炎病毒体外增殖的影响

2021-04-23毕英杰谢晶莹许淑娟邓盈盈李倬冯若飞

中国生物制品学杂志 2021年4期
关键词:检测

毕英杰,谢晶莹,许淑娟,邓盈盈,李倬,冯若飞

1.西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州730030;2.甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070

脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)于1945 年由HELWIG 和SCHMIDT 于佛罗里达州迈阿密首次分离[1],1958 年,巴拿马报道 EMCV 可感染猪并引起致死性心肌炎[2]。我国于2005 年首次分离获得EMCV,命名为BJC3[3]。该病毒属小RNA 病毒科,心病毒属,是无囊膜单股正链RNA 病毒,病毒衣壳为直径30 nm 的二十面体对称结构,每个衣壳由 VP1、VP2、VP3 和 VP4 4 种结构蛋白组成[4]。该病毒可致仔猪致死性心肌炎及怀孕母猪流产、产死胎与木乃伊胎,给各国养猪行业造成了巨大经济损失[5]。

干扰素诱导跨膜蛋白2(interferon induced transmembrane proteins 2,IFITM2)是干扰素诱导跨膜蛋白家族成员之一,1984 年,FRIEDMAN 等[6]通过 cDNA文库筛选,在经干扰素治疗的神经母细胞瘤中鉴定出IFITM 基因。目前,已在人类体内发现了IFITM1、IFITM2、IFITM3、IFITM5 和 IFITM10,其基因位于 11 号染色体上[7],其中IFITM2 主要位于细胞内相关区室,但具体位置尚未明确[8]。有研究证明,IFITM 是一种内源性限制因子,可抑制甲型流感病毒和登革热病毒[9],其抗病毒作用广泛,包括西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)、埃博拉病毒(ebola virus,EBOV)、马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)、中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)、人类免疫缺陷病毒1 型(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)、黄热病毒(yellow fever virus,YFV)、水泡性口炎病毒(vesicular stoma-titis virus,VSV)和丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)等[10-15]。本研究通过构建重组表达质粒pcDNA3.1-IFITM2,在 HEK293 细胞中探讨 IFITM2 对 EMCV 感染的影响,为后续其作用机制的深入研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 细胞、菌株、病毒、质粒及基因序列 HEK293细胞、BHK-21 细胞、感受态 E.coli BL21、EMCV 毒株PV21 及空载体pcDNA3.1 均由西北民族大学生物医学研究中心提供;……

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