苏小明，王岳杨，徐铭晨，陈悦琪，李贺，王春梅，陈建光，李正祎，庄文越*

1北华大学医学技术学院，吉林省吉林市 132013；2北华大学药学院，吉林省吉林市 132013；3吉林医药学院检验学院，吉林省吉林市 132013

皮肤衰老是人体衰老的一部分，由内源性和外源性的多种因素引起，主要包括基因对皮肤衰老过程的调控、自由基损伤和光刺激老化作用等。近年来，衰老与抗衰老已成为科学研究的热点[1-3]。五味子丙素(Schisandrin C，SchC)是五味子的主要木脂素类成分之一，可抑制细胞炎症反应、抗氧化及抑制凋亡蛋白的表达[4]。侯微等[5]研究发现，在H2O2诱导的细胞自由基氧化损伤衰老模型中，SchC可提高细胞存活率，但其对细胞的抗衰老和抗凋亡作用及其机制尚不清楚。为此，本研究分析了SchC对H2O2诱导的HaCaT细胞氧化应激损伤的保护作用及其可能机制，以期为SchC相关抗皮肤衰老产品的开发提供参考。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器 SchC(四川省维克奇生物科技有限公司)；HaCaT细胞(中国科学院细胞库)；CCK-8(上海碧云天生物技术有限公司)；超氧化物歧化酶(SOD)、微量丙二醛(MDA)、微量还原型谷胱甘肽(GSH)、活性氧(ROS)试剂盒及BCA蛋白试剂盒(南京建成生物工程研究所)；NF-E2相关因子2(Nrf-2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-9、caspase-3、caspase-9、Bcl-2、核因子-κB(NF-κB)、p-NF-κB(ABclonal公司)；RNA抽提试剂盒、HiScript Ⅱ Q RT SuperMix for qPCR、2×ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix(美国Vazyme公司)。全自动凝胶成像系统、ImageJ分析软件(上海天能科技有限公司)；Nrf-2抑制剂ML385(美国Abmole公司)；NF-κB抑制剂SN50(美国Selleck公司)。

1.2 细胞培养 用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养HaCaT细胞，置于37 ℃、5% CO2培养箱中。待细胞生长至80%融合时，用0.25%胰蛋白酶消化，分瓶传代。……