杨涛，苏忠，杨奕，刘剑，李高岩

(秦皇岛市第一医院 普外科，河北 秦皇岛 066000)

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是常见的消化道肿瘤之一，其发病机制尚未完全明确，严重影响人的生命健康并给家庭及社会带来沉重的负担。HCC具有易侵袭、易转移的特点，虽然近年来肝癌的诊疗技术有了飞速发展，但是HCC患者5年生存率仍未见明显提高[1]。寻找HCC新型分子生物学标志物是基础及临床研究的重点。既往研究发现，细胞外基质(extracellular matrix，ECM)的蛋白水解是肿瘤浸润和转移的关键步骤，而基质金属蛋白酶14(matrix metalloprotease 14，MMP14)被证实在此过程中发挥重要作用[2]。MMP14也被称为膜型1 MMP(MT1- MMP)，是MMP家族新成员，能够参与细胞基底膜和ECM的降解，促进肿瘤细胞的侵袭和转移[3]。MMP14通过上皮间质转化参与HCC的侵袭和远处转移[4]。本研究旨在探讨HCC组织中MMP14的表达水平及其与患者预后的关系。

1 材料与方法

1.1 样本来源

选取2008年6月至2013年5月本院手术切除的248例HCC癌组织标本及其配对的癌旁组织标本(距离癌组织边缘≥5 cm)。纳入标准：(1) 术前未接受放疗、化疗或免疫治疗；(2) 术后病理学检查确诊为HCC；(3) 病历资料完整。排除标准：(1) 合并其他部位肿瘤；(2) 随访资料不全。其中男173例，女75例；年龄43～71岁，平均(53.78±16.09)岁；HBsAg阳性179例；有肝门淋巴结转移140例；低分化139例，中高分化109例；TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期111例，Ⅲ～Ⅳ期137例。将术中切取的组织分成两部分:一部分冻存于-70 ℃冰箱，用于Western blotting检测；另一部分用福尔马林固定并用石蜡包埋，用于免疫组织化学染色。

1.2 Western blotting检测组织中MMP14的表达水平

随机选取6例HCC癌组织及其配对的癌旁组织进行检测。取组织100 g，冰上充分研碎后加入蛋白裂解液(武汉博士德生物工程有限公司)，以12 000 r·min-1离心15 min，收集上清液。……