蒋露，周静，唐姣

(湖南省妇幼保健院 妇产科，湖南 长沙 410008)

宫颈癌是世界第三大常见的女性癌症，每年新增56.9万例，其中265 700例死亡[1]。近年来，宫颈癌的发病呈年轻化趋势，并且发病率逐渐升高，严重威胁到患者的心身健康[2]。早期诊治对提高宫颈癌患者的生存时间及生命质量有重要意义。微小RNA(microRNA，miRNA)是长度为18～25 nt的非编码RNA，参与基因转录后的调控。既往研究[3- 4]已证实，miRNA广泛参与了细胞的增殖、分化、凋亡等生物学过程，在肿瘤的发生和发展中起到重要作用。miRNA- 223与宫颈癌在内的多种癌症进展有关[5- 8]。外泌体是活细胞分泌的纳米级囊泡小体，内含丰富的蛋白质、miRNA和lncRNA等,可以在细胞间转运，从而调节细胞的生物学功能[9]。本研究检测了宫颈癌患者血清外泌体miRNA- 223的表达水平，旨在探讨miRNA- 223在宫颈癌早期诊断及预后评价中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2010年1月至2014年1月本院收治的168例宫颈癌患者为研究对象(宫颈癌组)，均经过组织病理学检查确诊。行根治性子宫切除术和盆腔淋巴结切除术治疗，所有患者术前均未接受过放化疗。术前采集外周血5 ml，分离血清，用于提取外泌体miRNA- 223。另选取同期在本院进行健康体检的160例正常者为对照(对照组)，于体检当日采血。本实验经本院伦理委员会批准，所有受试者均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 血清外泌体的分离及鉴定 取宫颈癌患者血清1 ml，在4 ℃下以2 000 r·min-1离心15 min，取上清液。加入外泌体分离试剂(美国Sigam公司)，于4 ℃下静置15 min，以15 000 r·min-1离心2 min，弃去上清液，所留沉淀物即为外泌体，以50 μl的磷酸盐缓冲液进行重悬，分装后用于后续实验。……