郑声琴,范璟,郑勤,童金龙,田小强

(南京中医药大学附属南京医院/南京市第二医院 1.肿瘤科, 2.中心实验室， 江苏 南京 210003)

肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一，在全球恶性肿瘤发病率中排名第5位，而其死亡率位于恶性肿瘤死亡率的第4位，且有逐年上升趋势[1]。放射治疗在肝癌局部治疗中受到越来越多的重视，相继被列入各国肝癌的治疗指南当中，成为近年来肿瘤放疗学者关注的最新热点，在肝癌、早期非小细胞肺癌、椎体转移癌的治疗中发挥显著的局部控制疗效[2]。

肿瘤的免疫治疗是近年来最瞩目的治疗手段。肿瘤免疫治疗的研究方向主要是两个方面：一是在体外对T细胞进行基因修饰再回输到体内；二是通过抗体刺激免疫细胞使其发挥抗肿瘤作用[3]。本研究将从后者角度出发，以单次大分割放疗后肝癌细胞释放的蛋白为抗原负载树突状细胞(dendritic cell，DC)，探究其对DC表型、细胞因子分泌、功能的影响，旨为肝癌的临床治疗提供数据支撑。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年8月至2018年8月南京中医药大学附属南京医院收治的5例肝癌患者。纳入标准：通过病理学、CT和MRI检测，确诊为原发性肝癌的患者；患者无其他重要脏器重大疾病；患者签订本研究的知情同意书。采集患者外周血5 ml，用于后续研究。

1.2 主要试剂

RPMI- 1640和DMEM培养基均购自Gibco公司；淋巴细胞分离液购自南京三生生物技术有限公司；磁珠分选试剂盒购自美天旎公司；细胞因子IL- 4、GM- CSF和TNF- α购自PeproTech公司；流式抗体均购自eBioscience公司；……