朱银川，王丰云，杨雁华，宿东升，汤建民

心肌细胞凋亡参与了多种心血管疾病的发生及发展，如心肌梗死、心力衰竭及心律失常等；因此抑制心肌细胞凋亡，保护正常心肌细胞功能对治疗多种心血管疾病有重要意义[1,2]。研究表明长链非编码RNA（lncRNA）与心血管疾病的发生及发展有关[3]。研究报道LINC00265是缺血性卒中重要的lncRNAs生物标志物[4]。LINC00265在急性心肌梗死患者中上调表达[5]。LINC00265通过使miR-let-7a变海绵促进血管炎症和腹主动脉瘤的形成[6]。然而LINC00265对缺氧诱导的心肌细胞凋亡、增殖的影响及其机制尚不清楚。微小RNA（miRNA）是一类有调控功能的小分子非编码RNA，miRNA与心血管疾病密切相关，参与了心肌肥厚、心肌纤维化、动脉粥样硬化等，可作为一种生物标记物，为疾病诊断与治疗提供新依据[7]。研究报道miR-485-5p过表达可阻止苯肾上腺素诱导的线粒体裂变和心肌肥大[8]。因此本实验旨在研究LINC00265对缺氧诱导的心肌细胞凋亡、增殖的影响及其机制是否与miR-485-5p有关。

1 材料与方法

1.1 实验材料 心肌细胞H9C2购自无锡欣润生物科技有限公司；RPMI-1640培养基、胎牛血清购自；Trizol试剂、反转录试剂盒、SYBR Premix ExTaqTM试剂盒购自日本Takara公司；细胞周期检测试剂盒购自北京凯瑞基生物科技有限公司；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭（Annexin V-FITC/PI）凋亡检测试剂盒、双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；RIPA蛋白裂解液、二辛可宁酸（BCA）试剂盒购自厦门慧嘉生物科技有限公司；抗体购自武汉维诺赛生物技术有限公司。

1.2 分组 将H9C2细胞用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液，取对数生长期细胞H9C2，将其置于含95%N2和5%CO2的培养箱中缺氧处理3 h，然后于正常培养条件下培养，记为模型组，正常培养的细胞作为对照组。……