韩世纪 ，练国达 ，陈少杰 ，黄开红 *，李佳佳

胰腺癌恶性程度高，肿瘤间质纤维化是其重要病理特征，纤维化程度与不良预后相关［1］。胰腺癌结缔组织致密压迫血管造成组织内有效灌注少，组织本身血管分布较少、缺氧明显，极大地限制了组织局部的化疗药物浓度及药效发挥，给胰腺癌治疗带来极大挑战［2，3］。胰腺纤维化的形成是一个由复杂信号网络调控、以胰腺星形细胞（pancreatic stellate cells，PSCs）活化为中心、多种细胞因子参与、最终以成纤维细胞增生和细胞外基质（extracellular matrix，ECM）沉积为特征的复杂病理发展过程［4］。当胰腺损伤或发生病变（如慢性胰腺炎或胰腺癌等）时，PSCs 被激活为肌成纤维样细胞，增殖活跃、脂质成分减少、表达α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）和结蛋白（desmin），以α-SMA 为较公认的PSCs 活化标志。在其活化过程中，伴随过量细胞外基质蛋白比如Ⅰ型和Ⅱ型胶原蛋白（collagen type Ⅰ、Ⅱ）、纤维结合蛋白（Fibronectin）表达，基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinase，MMPs）及其抑制剂的合成，这些基质成分也是导致胰腺癌耐药的重要原因之一［4，5］。

近年来，PSCs 相关研究越来越多，但大部分实验用细胞主要来源于小鼠或大鼠胰腺分离的PSCs，仅有部分实验使用组织块outgrowth 培养法获得原代培养的人 PSCs（human PSCs，hPSCs）［6-12］。由于胰腺组织来源有限，原代培养条件复杂且耗时，纯化得到的原代细胞持续分裂能力有限，多使用第3 代至第 8 代［12，13］；并且由于同一标本所得 PSCs 难以持续分裂足够细胞用于后续功能实验；而不同组织标本来源PSCs 异质性较大，实验数据一致性和可靠性差。随着科学技术发展，永生化建细胞系技术逐渐成为构建预期表型细胞系的重要手段之一。……