李红娟，郭洁洁，王琳琳

帕金森病（PD）是一种常发生于老年人的锥体外系疾病[1]，大部分为散发，5%～10%为早发型[2]，随年龄的增长，其发病率和患病率也相应增加。近年来基因成为PD 致病原因的研究热点，且研究表明不同基因所致PD 患者的表现具有异质性[3]。DJ-1 基因即PARK7，有剪切位点突变、截短突变和大片段缺失等10 余种不同的突变[4]。本研究探讨浙江省温岭地区DJ-1 基因位点g.168_185del的多态性与PD 发病的关系，报道如下

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2016 年11 月至2018 年12 月就诊于浙江省温岭市第一人民医院神经内科及康复科的原发性PD 患者109 例（PD 组），其中男60 例，女49 例；年龄31 ～85 岁，平均（64.4±11.8）岁。另选同期来本院体检中心无PD的健康者105 例（对照组），其中男56例，女49 例；年龄33 ～87 岁，平均（65.6±12.4）岁。两组性别、年龄差异均无统计学意义（均P ＞0.05）。

1.2 诊断及排除标准 以英国Brain-Bank 诊断标准进行筛查[5]，有条件者可做颅脑CT 或MRI 检查。排除标准：其他神经系统疾病、继发性PD、帕金森叠加综合征及甲状腺功能亢进等。

1.3 方法

1.3.1 DNA 的提取 抽取受试者静脉血2 ml，乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝，使用北京天根中量血提取试剂盒提取DNA。检测DNA 纯度均在1.7 ～1.9，浓度均≥15 ng/ l。抽血前应根据知情自愿的原则签署同意书。

1.3.2 引物设计与合成 运用primer3设计聚合酶链反应（PCR）扩增引物，扩增片段长度为277 bp。扩增的上下游引物详见文献[6]。

1.3.3 PCR 扩增 PCR 反应条件为：在Biometr热循环仪上95℃先预变性5min，再95 ℃变性40 s，再58 ℃退火30 s，后72 ℃变性30 s，再72 ℃10 min，使其得到充分的延伸。PCR 总反应体积为20 l。

1.3.4 PCR扩增产物基因型鉴定 鉴定所扩增259 ～277 bp 部分，该片段如出现TGTGCTGGACGGTGTCCC 18 个碱基序列，判定为g.168_185del 多态位点的插入/插入型，见封三彩图2；……