王明燚，朱 燕

（1.上海交通大学附属第六人民医院生殖医学中心，上海 200233；2.中南大学湘雅三医院医学检验系，湖南 长沙 410013）

卵母细胞的透明带，是包绕在哺乳动物卵细胞以及植入前胚胎外的厚层不溶性透明丝状带基质，是卵母细胞胞外非常重要的结构[1]。哺乳类动物的透明带厚度不一，人类卵子透明带的平均厚度大约为17 μm。人透明带由4 种分泌型糖蛋白，即透明带蛋白(zona pellucida,ZP)-1(ZP1)、-2(ZP2)、-3(ZP3)和-4(ZP4)聚合成单层膜，由ZP1 连接在一起形成海绵样三维矩阵结构。4 种ZP 是由生长期卵母细胞和颗粒细胞共同分泌到卵周间隙组成[2]。

人ZP 前体的N 端信号肽在进入粗面内质网后被内质网腔面的信号肽酶切除，其C 端的尾部确保ZP 在经过卵细胞内膜系统以及在胞内囊泡运输时保持独立，不在细胞内过早发生聚合。该C 端跨膜结构域及尾部在蛋白质跨越细胞膜时被切除，ZP的主体带域则分泌到卵母细胞外，相互聚集、组装形成完整的透明带[3]。

透明带作为哺乳动物精卵结合种属特异性的结构，提供了物质支持和调节生物学功能的作用[4]，在卵子发育、精卵识别及结合并诱发精子顶体反应、阻止多精受精、保护胚胎植入子宫前的发育等生殖生理过程中扮演着重要角色，对其结构和功能特征的研究是目前的研究热点[5]。

本研究采用基因重组及多种成熟的分子生物学技术，在体外构建了人透明带4 种蛋白的荧光表达质粒，可供今后进一步研究ZP 间的相互作用。用绿色荧光蛋白(ZsGreen)标记ZP1、ZP2，红色荧光蛋白(mCherry)标记ZP3、ZP4。……